怎么筛选肿瘤干细胞（肿瘤干细胞怎么获得）
- 作者: 刘慈音
- 来源: 投稿
- 2024-12-18
1、怎么筛选肿瘤干细胞
肿瘤干细胞筛选方法
1. 表面标记筛选
利用肿瘤干细胞特异性表面标记的抗体，通过流式细胞术或磁珠分选技术从异质性肿瘤细胞中分离肿瘤干细胞。
常见标志物：CD133、CD44、CD24、ALDH1A1、ESA
2. 功能性筛选
根据肿瘤干细胞的功能特性，如自我更新和分化潜能，进行筛选。
悬浮培养筛选：肿瘤干细胞在血清培养基中悬浮生长，而其他细胞则贴壁生长。
克隆形成试验：肿瘤干细胞在软琼脂或半固体培养基中形成菌落，而其他细胞则不能。
3. 侧群筛选
利用细胞膜转运蛋白表达的差异性，通过流式细胞术筛选肿瘤干细胞。
侧群细胞：通过高转运活性，排除排毒染料，表现出侧向分布在流式细胞图上。
4. ALDEFLUOR 活性筛选
ALDH1A1 是肿瘤干细胞中的标志性酶，转化 ALDEFLUOR 前体成为荧光产物。
通过流式细胞术或显微镜检测 ALDEFLUOR 荧光阳性细胞来筛选肿瘤干细胞。
5. 免疫选择筛选
利用靶向肿瘤干细胞特异性抗原的抗体，通过免疫磁珠分选技术或细胞毒性方法，从异质性肿瘤细胞中分离肿瘤干细胞。
6. 表观遗传筛选
肿瘤干细胞具有独特的表观遗传修饰模式。
通过免疫沉淀、染色质免疫共沉淀或甲基化特异性 PCR 等技术，筛选出具有特定表观遗传标记的肿瘤干细胞。
7. 微流控筛选
利用微流控技术的精确尺寸控制和细胞操作能力，通过细胞大小、变形或表面标记等特征筛选肿瘤干细胞。
注意事项肿瘤干细胞的表面标记和功能特性可能因肿瘤类型而异。
不同的筛选方法可能针对不同亚群的肿瘤干细胞。
为了全面表征肿瘤干细胞，建议结合多种筛选方法。
2、肿瘤干细胞怎么获得
体外获得肿瘤干细胞的方法：
细胞分类：利用细胞表面标志物或功能性特征将肿瘤细胞分成不同的亚群，富集肿瘤干细胞。
类器官培养：在三维培养基质中培养肿瘤细胞，自组织形成类器官，其中含有肿瘤干细胞。
转染：将已知的肿瘤干细胞相关基因转染到肿瘤细胞中，诱导细胞获得肿瘤干细胞特性。
体内获得肿瘤干细胞的方法：
肿瘤异种移植：将人类或动物肿瘤细胞移植到免疫缺陷小鼠体内，建立异种移植瘤，其中可能含有肿瘤干细胞。
癌症干细胞标记小鼠：利用特定标记物识别和追踪癌症干细胞，构建癌症干细胞标记小鼠模型。
注意：不同的肿瘤类型可能采用不同的方法获得肿瘤干细胞。
获得的肿瘤干细胞数量和纯度可能参差不齐，需要进一步优化和验证。
肿瘤干细胞具有高度异质性，获得的细胞亚群可能包含不同表型和功能的肿瘤干细胞。
