神经干细胞如何保存(神经干细胞如何保存时间长)
- 作者: 张樱珞
- 来源: 投稿
- 2024-12-11
1、神经干细胞如何保存
神经干细胞的保存方法
神经干细胞是一种多能干细胞,具有自我更新和分化为神经元和神经胶质细胞的潜力。它们用于研究神经发育、神经损伤和神经退行性疾病。以下是神经干细胞的保存方法:
1. 冷冻保存
将神经干细胞悬浮在含有保护剂(如二甲基亚砜)的培养基中。
将悬液快速冷冻至80°C。
在液氮中长期保存。
2. 玻璃化
与冷冻保存类似,但使用更高的保护剂浓度。
将悬液以非常高的速率冷却,形成玻璃状物质。
在液氮中保存。
3. 低温冷藏
将神经干细胞悬浮在含有保护剂的培养基中。
在4°C下保存长达几周。
4. 细胞系
建立神经干细胞的永生化细胞系,使其无限期增殖。
细胞系可冷冻或低温冷藏保存。
5. 三维培养
将神经干细胞培养在三维支架或基质中,形成类器官或神经球。
类器官或神经球可冷冻或低温冷藏保存。
保存注意事项
保护剂的选择:使用合适的保护剂(如二甲基亚砜或聚乙二醇)以防止细胞损坏。
冷却/复温速率:快速冷却和复温对于细胞存活至关重要。
培养基的成分:培养基应含有合适的生长因子和营养物质。
细胞存活评估:在保存和解冻后评估细胞存活率和分化能力。
通过遵循适当的保存方法,神经干细胞可以维持其增殖和分化潜力,便于长期研究和治疗应用。
2、神经干细胞如何保存时间长
神经干细胞保存的长期策略
冷冻保存传统冷冻保存法:
将神经干细胞悬浮在冷冻保护剂中
缓慢冷却至80°C
储存液氮中(196°C)
可保存数十年
玻璃化冷冻保存法:
在冷冻保护剂中迅速冷却细胞形成玻璃状
跳过结晶形成步骤,减少对细胞的伤害
可在室温或冰箱中保存数月至数年
低温保存室温培养:
将神经干细胞培养于特殊的培养基中
保持在特定温度(例如 4°C)
可保存数天至数周
线性培养:
将神经干细胞培养于低氧环境中,并以低剂量喂养生长因子
可保持神经干细胞状态数月至一年
悬浮培养:
将神经干细胞培养于凝胶状培养基中或悬浮于培养基中
可保持神经干细胞状态数月至一年
干细胞库生物库:专门设施,用于储存和管理人类或其他物种的干细胞
细胞库:储存来自特定研究或临床试验的神经干细胞
生物库可采取冷冻保存或低温保存方法,确保细胞的长期存活和可追溯性。
其他策略冻干:从神经干细胞中去除水分,形成粉末状物质。可在室温下保存数月至数年。
脱细胞:通过移除细胞内部成分,将神经干细胞转化为支架。可促进神经干细胞附着和分化。
3、神经干细胞如何保存和运输
神经干细胞的保存
低温保存:使用液氮在极低温度(196°C)下冷冻保存,可以长期保存神经干细胞的活性。
冷藏保存:在4°C冷藏条件下保存,保存时间较短,通常不超过几周。
生物冷冻剂保护:在冷冻过程中使用特殊的二甲基亚砜(DMSO)或其他保护剂,以防止细胞膜损伤。
神经干细胞的运输
低温运输:使用专门的低温运输容器,如干冰液罐或液氮罐,以保持低温。
生物冷冻剂运输:将细胞悬浮在含有生物冷冻剂的培养基中,然后使用低温运输容器运送。
冷藏运输:使用保温容器和冰袋,在4°C左右的温度下运输细胞。
特殊注意事项
仔细准备和处理:在保存和运输过程中,避免对细胞造成机械应力或其他损伤。
选择合适的容器:使用经过验证且符合细胞保存或运输要求的容器。
监测温度:运输过程中经常监测温度,以确保温度保持稳定。
快速处理:一旦细胞到达目的地,应立即取出并转运到培养或使用地点。
专业知识:神经干细胞的保存和运输应由具有相关专业知识的合格人员进行。
4、神经干细胞从哪里提取
神经干细胞可以从以下位置提取:
胚胎:神经干细胞存在于胚胎大脑海马体和嗅球区。
胎儿:神经干细胞存在于胎儿大脑的皮层、基底神经节和脑干。
成体:神经干细胞存在于成体哺乳动物大脑中的特定区域,包括:
海马体齿状回颗粒细胞层
嗅球
基底神经节中的黑质腹侧和尾状核
大脑皮层(限于新生儿)