造血干细胞如何计数（造血干细胞检测结果多少数值合格）
- 作者: 张晞尔
- 来源: 投稿
- 2024-12-11
1、造血干细胞如何计数
造血干细胞计数
造血干细胞 (HSC) 的计数对于评估骨髓移植和干细胞治疗的潜在有效性至关重要。下面介绍了两种常用的方法：
1. 流式细胞术（FACS）
原理：使用荧光标记的抗体来识别并计数 HSC 表面的特定抗原，如 CD34、CD38、CD90 和 CD45RA。
步骤：从骨髓或外周血中提取细胞。
用标记抗体染色细胞。
使用流式细胞仪对细胞进行分析，识别符合 HSC 表型（抗原表达模式）的细胞。
计数阳性细胞以确定 HSC 浓度。
2. 限制性稀释培养（LDA）
原理：基于 HSC 在半固体培养基中形成集落的潜力。HSC 被稀释到不同的浓度并培养在培养基中。能够形成集落的细胞被认为是 HSC。
步骤：从骨髓或外周血中提取细胞。
将细胞稀释到不同的浓度。
将细胞接种到半固体培养基（如甲基纤维素）中。
培养细胞并计数形成集落的细胞，每个集落代表一个 HSC。
考虑因素：
HSC 计数因个体、疾病状态和使用的特定抗体或培养基而异。
精确的计数需要熟练的技术人员和标准化的程序。
FACS 和 LDA 可以互补地用于更准确的 HSC 计数。
2、造血干细胞检测结果多少数值合格
合格数值因检测方法和实验室而异。一般来说，合格的造血干细胞检测数值范围为：
骨髓穿刺活检：
有核细胞百分比：> 90%
造血干细胞（CD34+）百分比：> 0.5%
外周血动员：
造血干细胞（CD34+）绝对计数：> 5 x 10^6 / kg 体重
脐带血：总核细胞数：> 1.5 x 10^8 / kg 体重
造血干细胞（CD34+）百分比：> 1%
请注意，这些数值仅供参考。具体合格标准应咨询您负责的医生或实验室。
3、造血干细胞计数的国际标准方案
造血干细胞计数的国际标准方案
材料：肝素抗凝血液样本
流式细胞仪
抗体标记：CD34、CD45、HLADR、CD38、CD123、CD117 等
步骤：1. 样本制备：
收集肝素抗凝全血样本。
在 24 小时内使用新鲜血液或冻存血液样本。
2. 红细胞裂解：
使用市售的红细胞裂解液裂解红细胞。
按照制造商的说明进行操作。
3. 染色：
使用抗体标记的抗体混合物标记细胞。
具体选择的抗体取决于所需分析的造血干细胞亚群。
4. 流动细胞分析：
使用流式细胞仪分析标记的细胞。
基于标记表达，将造血干细胞群从其他细胞群中区分开来。
5. 分析：
使用流式细胞分析软件对细胞群进行分析。
根据抗体标记表达，确定造血干细胞的百分比和绝对计数。
分类：CD34+ 造血干细胞：CD34+、CD45?、HLADR?
CD34+ 干祖细胞：CD34+、CD45+、HLADR?
CD34+ 祖细胞：CD34+、CD45+、HLADR+
参考范围：
造血干细胞计数通常表示为每微升 (μL) 血液中的细胞数。参考范围因实验室和使用的抗体标记而异，但一般为：
CD34+ 造血干细胞：2060 个/μL
CD34+ 干祖细胞：515 个/μL
CD34+ 祖细胞：50150 个/μL
注意事项：
使用标准化的操作程序和抗体标记以确保结果的一致性。
细胞保存和运输条件可能会影响造血干细胞计数。
结果受供者年龄、健康状况和疾病状态的影响。
这些指南提供了造血干细胞计数的标准化方法，但可能根据具体研究或临床需求进行调整。
4、造血干细胞计数是什么意思
造血干细胞计数（HSC Count）
是指测量血液或骨髓中造血干细胞（HSC）数量的过程。
造血干细胞 (HSC)
HSC 是未分化的细胞，可以产生所有类型的血细胞（白细胞、红细胞、血小板）。
HSC 主要存在于骨髓中，少量存在于脐带血和外周血中。
造血干细胞计数的意义
诊断和监测血液疾病：HSC 计数可用于诊断和监测白血病、淋巴瘤等血液疾病，其中 HSC 数量可能会异常。
评估干细胞移植的成功率：在干细胞移植后，HSC 计数可用于监测移植的成功率和早期发现移植排斥反应。
研究造血过程：HSC 计数可用于研究造血过程，包括 HSC 的产生、增殖和分化。
预测治疗反应：在某些血液疾病中，HSC 计数水平与治疗反应和预后有关。
如何进行造血干细胞计数
HSC 计数通常通过以下方法进行：
流式细胞术：使用抗体对 HSC 表面的特定标志物进行标记，然后通过流式细胞仪计数标记的细胞。
免疫荧光显微镜：使用荧光标记的抗体对骨髓切片中的 HSC 进行染色，然后在显微镜下计数荧光细胞。
参考范围HSC 计数的参考范围因年龄、性别和种族而异。一般来说，成人骨髓中的 HSC 计数范围为 1050 个/μL。
注意事项HSC 计数可能因采样部位、检测方法和实验室差异而有所不同。
急性或慢性感染、某些药物和其他因素可能会影响 HSC 计数。
