干细胞冷藏活 🐦 性损失（干细胞 🦢 储存条件及年限）
- 作者: 胡恩晞
- 来源: 投稿
- 2025-02-17
1、干 🦊 细胞冷 🐬 藏活性损失
干细胞 🕊 冷藏活性损失
干细胞冷藏是指将干细胞在低温下储存以保持其活性冷藏。过程可能会导致干细胞活性的损 🐼 失，这是 🌺 。由于冷冻过程中细胞损伤 🐶 和冷冻保护剂的毒性作用
活性损失 🐶 的原因
细 🐼 胞损 ☘ 伤 🐕 ：
冰晶形成：水 🦊 在冷冻过程中结晶 🐶 形成冰晶，这。些 冰晶，可。以刺穿细胞膜并导致细 🦆 胞死亡
渗 🐟 透压冲 🐟 击：冷冻过程中，细，胞内外的渗透压会发生变化这可能导致细胞脱水或涨裂。
冷 🌳 冻保护剂 🐟 毒 🦁 性：
二甲基亚砜 (DMSO)：这是一种冷冻保护剂，可以保护细胞免受冰晶损伤。高 🌿 浓度的 🍁 DMSO 也可。能是细胞毒性的
丙烷 🌳 1,2二醇 (PG)：另 🦈 一种冷 💮 冻保护剂，也可能对细胞具有毒性作用。
活性影响增殖能力：冷藏可能会降低干细胞的增殖能力，这可能会影响它们的 🐈 治疗潜力。
分化能力：干细胞 🐘 在冷藏后可 🌺 能会表现出分化能力的变化。
基因表达：冷藏可以改变干细胞的基因表达谱，这可能会影 🐎 响它们的特性。
免疫反应：冷藏后的干细胞可能会受到免疫系统的攻击，从而降低它们的 🦍 存活率。
减轻 🍀 活性损失的方 🌼 法 🐧
缓慢冷冻缓慢：逐步降低温度可以 🪴 减少冰晶形 🦄 成。
使用高浓度冷冻保 🐦 护剂高浓 🐅 度：的冷冻保护剂可 🐠 以更好地保护细胞免受冰晶损伤。
逐 🐴 步解冻：缓慢 🌳 逐步提高温度可以防止渗透压冲击。
抗氧化剂处理抗氧化剂：可以减少 🐅 冷藏过程中的氧化损伤。
结论干细胞冷藏虽 🐶 然为储存和运输干细胞提供了可能，但可能会导致活性的损失。通，过。使用减轻活性损失的方法可以最大限度地保持干细胞的活力 🐡 和治疗潜力
2、干细胞储 🦁 存条件 🐅 及年限
干细胞 🦊 储 🪴 存 🕊 条件
温度：液 🐈 氮 🐒 (196°C)
氦 🐧 气 🦉 (269°C)
容器：液氮罐或 🦟 冷 🐛 冻箱 🦅
密封瓶或安瓿瓶 🦈
储存年限干细 🐠 胞的 🐛 储存年限取决于储存方法和 🕸 细胞类型：
多 🌴 能干细胞（ESCs 和 🐋 iPSCs）：
液氮储 🦄 存 🍀 ：至少 10 年 🌾
造血 🐝 干细 🐬 胞 🦄 （HSCs）：
液氮储 🌹 存 🍁 ：至少 15 年
间充质干细胞 🐯 （MSCs）：
液氮储存：至 🐅 少 10 年
胚胎干 🌳 细胞 🐞 胚（泡 🕷 ）：
液 🦉 氮储存：至 🐶 少 5 年
其他储存考虑因 🐘 素 🐱 ：
储存设施的认证：选择经国际组织认可 🌻 的储存 🦈 设 🍁 施，例如 AABB 或 ISCT。
定期监测：储存设施 🌻 应定期监 🌾 测温度和细胞活力。
细胞数量和质 🌳 量：储存前应评估细胞的 🦅 数量和质量。
解冻和再冷 🐦 冻解冻和再冷 🐘 冻：过程应小心进行，以最大限度地减少细胞损伤。
注意 🐴 事 🐵 项：
虽然长期储存有可能，但，随着储存时间的延长细胞活性可能会 🐳 下降。
储存成本 🦄 可能很高，并且随着时间 🐅 的推移 🦅 而增加。
并非所有类型的干细胞都适用于长期储 🪴 存。
3、干细胞冷 🦊 冻保存费用 🐈
干细 🌵 胞冷 🐳 冻保存费用 💐
干细胞冷冻保存的费用因不同的机构和提供的服务 🕸 类型而异。以下是影响费用的几个因素：
干细胞类型：不同的干细胞类型（例如脐带血干细胞、骨、髓干细胞脂肪干细胞）可能会 🦈 具有不同的冷冻保存 🐈 成本。
冷冻保存方法冷冻保存：技术（例如缓慢冷 🐠 冻或玻璃化）也会影响成本。
存储时间存储：干细 🌻 胞 🌺 的时间长度也会影响总成本。
机构：不同机构 🐘 的定价策略和 🌵 额外服 🍀 务的可用性也会影响费用。
一般费 🦍 用范 🐅 围
根 🌳 据美国冷冻保存协会 (CFPA)，干细胞冷冻保存的一般费用范围如下：
一次性费用：2,000 至 6,000 美 ☘ 元
年度存储费：100 至 500 美元 ☘
额外费用除了上述费用外，还，可能产 🌿 生其他费用 🐴 例如 🐠 ：
运费提取费（如果您以 🌳 后需要提取干细胞）
解冻费咨询或基 🦁 因 🐧 检测服务
提示在选择冷冻 🌾 保存机构之前，请务必比较不同的费用和服务。
考虑长期存储 🐕 成本。
咨询 ☘ 医疗专业人士以了解有关冷冻保存的好 🐦 处和风险的 🌾 更多信息。
探索任 🐝 何可用的保险或财务援 🐋 助计划。
注意：这些 🌻 费用仅供参考，实际费用可能会根据具体情况而有 🌲 所不同。建。议咨 🪴 询您感兴趣的冷冻保存机构以获取准确的报价
4、细胞冻存的注意事 🐞 项
细 🐞 胞冻存 🐼 的注意事 🐡 项
收集 🐧 和 🐶 制备细胞 🐎
使 🦍 用健康、生长的细胞 🐘 。
从 🐳 无菌培 🐡 养物中收集细胞，以避免污染。
按照 🌹 已建立的方案分离和 🐋 纯化细胞。
培养基 🐦 选 🌿 择 🐱
使用含血清的培养 🌼 基或 🕸 无血清 🍁 的冷冻培养基。
血清浓度应 🦅 在 510% 之间 💮 。
避免使用 🐵 含抗 🐟 生 🦁 素的培养基。
冷 🌷 冻保护剂
常用的冷冻保 🦄 护 🐘 剂是 🌷 二甲基亚砜 (DMSO) 和甘油。
DMSO 浓度 🐋 应 🐅 为 510%，甘油浓度应为 🌲 1020%。
将冷冻保护剂缓慢添加到细胞悬液中，以避免细胞损伤 🐎 。
冻存过程将细 🐼 胞悬液分成小体积（12 mL）。
将细胞悬液转移到冷冻管中，并留出足够的顶部空间以 🦉 容纳体积膨胀。
使用冰浴将细胞悬液逐步冷却至 20°C，然后 🐋 以 1°C/min 的速 🦅 率冷却至 80°C。
将冷冻管 🐺 转移至液氮中进行长期储存。
解冻过程将 🕊 冷冻管从液 🌵 氮中取出，置于 🌷 37°C 水浴中解冻。
解冻后，立即稀释细胞悬液以去 🦍 除冷冻保护剂。
用新鲜培养基洗涤 🐛 细胞，并将其转移到培养 🐱 皿 🐝 或培养瓶中。
注意事项使用高品质的材料和 🐕 试剂。
仔细遵循 🐝 冷 🐴 冻和解冻方案。
避免反复冷冻 🐒 和解冻细 🍁 胞。
解冻后，监测细胞存活率 🌼 和 🐦 活 🍁 力。
为防止交叉污染，对所有冷冻管进 🍁 行适当标记。
定期对 🦍 液氮罐进行液位监测，以确 🦈 保液氮充 🦊 足。
