干细胞储存技术操作（干细胞储存技术操作流程图）

1、干细胞储存技术操作

干细胞储存技术操作

采集干细胞

脐带血采集：出生时从脐带中收集血液。

骨髓采集：从骨盆或胸骨中抽取骨髓。

脂肪组织采集：从腹部或臀部抽取脂肪组织。

处理干细胞

分离：使用离心机或其他方法将干细胞与其他血液成分或组织成分分离。

纯化：使用抗体或其他技术进一步纯化干细胞，去除不必要的细胞和碎片。

培养：将干细胞在实验室培养基中培养，以扩增其数量。

储存干细胞

冷冻保存：将干细胞悬浮在冷冻保护液中，然后在液氮中冷冻保存。

深低温保存：将干细胞储存在196°C的液氮罐中长期保存。

解冻干细胞

快速解冻：将干细胞样本浸入37°C的水浴中快速解冻。

缓慢解冻：将干细胞样本保存在37°C的培养箱中缓慢解冻。

应用干细胞

移植：将培养的干细胞回输到患者体内治疗疾病或损伤。

再生医学：使用干细胞在体外生成组织或器官用于移植。

研究：使用干细胞研究疾病机制和开发新的疗法。

安全注意事项

采集限制：只能在经批准的医疗机构进行干细胞采集。

污染控制：严格遵守无菌操作规程以防止污染。

筛选捐赠者：对干细胞捐赠者进行疾病筛查以确保干细胞的安全性。

知情同意：在采集和储存干细胞之前获得患者或捐赠者的知情同意。

监管：干细胞储存机构应遵守监管机构的指南和标准。

2、干细胞储存技术操作流程图

干细胞储存技术操作流程图

1. 采集干细胞

从脐带血、骨髓、脂肪组织等来源采集干细胞

2. 纯化和处理干细胞

使用离心、磁珠分选等方法分离和纯化目标干细胞

过滤和离心以去除血小板和杂质

3. 冷冻保存干细胞

在DMSO（二甲基亚砜）保护下冻存在液氮中（196°C）

储存温度精确控制在液氮蒸气相或液氮液面以下

4. 细胞培养和扩增（可选）

在合适的培养基和环境条件下培养和扩增干细胞

进行细胞计数、活力检测和分化潜能评估

5. 品质控制和测试

定期监测储存条件和细胞完整性

进行细胞活力、分化潜能和遗传稳定性测试

6. 解冻细胞

在受控条件下快速解冻细胞

使用洗缓冲液去除保护剂

7. 输注或研究

将干细胞输注给患者或用于研究目的

解冻后的细胞活力和分化潜能应符合标准

附加流程：

HLA分型：确定干细胞的组织相容性抗原类型

病原体筛查：检测传染性病原体，确保细胞的安全

细胞标记：使用荧光或磁性标记追踪细胞

3、干细胞储存技术操作视频

干细胞储存技术操作视频

视频 1：造血干细胞收集

步骤 1： 准备捐赠者，通过静脉注射给予动员剂。

步骤 2： 收集捐赠者的外周血。

步骤 3： 进行干细胞分离，将造血干细胞与其他血液成分分离。

步骤 4： 将分离后的干细胞放入储存袋。

步骤 5： 在液氮中冷冻储存干细胞。

视频 2：脐带血干细胞收集

步骤 1： 接生时，收集产妇脐带血。

步骤 2： 将脐带血放入收集袋。

步骤 3： 进行干细胞分离，将造血干细胞与其他脐带血成分分离。

步骤 4： 将分离后的干细胞放入储存袋。

步骤 5： 在液氮中冷冻储存干细胞。

视频 3：脂肪组织干细胞采集和分离

步骤 1： 从捐赠者腹部或大腿采集脂肪组织。

步骤 2： 将脂肪组织进行离心，分离出脂肪细胞。

步骤 3： 进行干细胞分离，将脂肪组织干细胞与脂肪细胞分离。

步骤 4： 将分离后的干细胞放入储存袋。

步骤 5： 在液氮中冷冻储存干细胞。

视频 4：干细胞复苏和移植

步骤 1： 从液氮中取出储存的干细胞。

步骤 2： 对干细胞进行复苏，使其恢复活性。

步骤 3： 将复苏后的干细胞通过静脉注射到患者体内。

步骤 4： 干细胞进入骨髓并开始增殖，产生新的造血干细胞。

步骤 5： 移植后的干细胞在患者体内恢复造血功能。

4、干细胞储存技术操作流程

干细胞储存技术操作流程

1. 样品采集

从脐带血、骨髓或其他组织中采集干细胞。

将样品转移到无菌容器中。

2. 样品处理

在无菌环境下，分离和富集干细胞。

清除红细胞、血小板和其他杂质。

将干细胞悬浮在培养液中。

3. 冷冻保存

将干细胞悬浮液分装到冷冻管中。

加入冷冻保护剂以防止冷冻损伤。

将冷冻管放入液氮中逐步冷冻至196°C。

4. 储存

将冷冻管存储在液氮罐中，温度保持在196°C。

液氮罐安装监控系统以确保温度稳定。

5. 解冻和移植

当需要使用干细胞时，将冷冻管取出液氮罐。

在控制条件下将干细胞快速解冻。

洗脱冷冻保护剂并重新悬浮干细胞。

将干细胞移植到患者体内。

质量控制措施

每个操作步骤都遵循严格的无菌技术。

样品在整个过程中进行测试以确保细胞活力和纯度。

储存设施定期监测以确保合适的储存条件。

定期进行解冻和移植研究以评估干细胞的生存能力。