干细胞酶消化与离心（间 🐯 充质 💐 干细胞消化时间）

1、干 🌲 细胞酶消化 🐞 与离心

干细 🌾 胞酶消化与离 🍁 心

酶消化和离心是分离和收集干细胞的两种常见方法酶消化。涉及使用酶来分解组织外基质，释，放。出干细胞然后通过离心将 🌿 这些干细胞与基质分离

收 🌺 获组织

胶原 🌵 酶酶溶液

其他酶 🐡 （例如，透明质 🐘 酸酶）

培养瓶或 🌻 培 🐼 养皿 🕸

1. 将收获的组 🌵 织切 🐱 成小块。

2. 将组 🐞 织块转移 🐦 到含有胶原酶酶溶液的培养瓶中。

3. 在 37°C 搅 🍁 拌孵育 3060 分钟。

4. 添加其 🐼 他酶（如果需要）以进一步分解组织。

5. 定期搅拌以确保酶溶液均匀接 🐬 触组织。

1. 将消化 🌾 后 🦅 的组织转移到培养基中。

2. 将 🐕 细 🌾 胞悬液轻柔地混合 🦢 以分离松散的细胞。

3. 将 🐘 细胞悬液转移到离心管中 🦍 。

4. 以 🐵 rpm 离 🐝 心 510 分钟 🦋 。

5. 小心移 🐞 除上清液，留下沉 🐱 淀的细胞 🐕 。

洗涤 🌺 和 🪴 收集 🦅

1. 用培养基 🐠 洗涤细胞沉淀以去除残留的酶和组织碎片。

2. 再次 🐟 离心并 🐳 丢弃上清液 🐦 。

3. 将干细胞沉淀收集到培养瓶或 💮 培养皿中，进行培养或进一 🦢 步分析。

消化时间和酶浓度必须根据组织 🐞 类型进行优化。

搅拌有助 🦋 于促 🦍 进 🕸 酶消化。

离心力太大会导致细胞损伤 🐦 。

使 🦈 用无菌技术以防止污染。

干细胞是脆弱的细胞，在分离过程 🪴 中 🐬 必须小心处理。

2、间充质干 🐼 细胞消化时间

间充质 🦁 干细胞消化时间

间充质干细胞 (MSC) 消化时间因以 🐕 下因素而异：

组织 🐼 来源：不同组织来源的 MSC 消化时间不同，例 💐 ：如 🐒

骨 🐴 髓 🌿 ：3060 分钟

脂肪组 🌲 织：6090 分钟

脐带 🍁 ：4575 分 🐝 钟 🌷

组织大小 🦉 ：较大的 🦋 组织样本需要更长的消化时间。

消化酶：使用的消化酶类型和 🦄 浓度会影响消化时间。通常使用的酶包括胶原酶、透。明质酸 🌲 酶和脂肪酶

温度：消化在 37°C 下进行，这 🕊 是 MSC 的最佳生长温度。

典型 🐞 消 🪴 化时间 🐼 范围：

骨 🐕 髓 MSC：3060 分钟

脂 🦈 肪组织 MSC：6090 分 🦋 钟

脐带 MSC：4575 分钟 🐈

羊膜 MSC：3060 分 🦈 钟

牙 🐠 髓 MSC：6090 分 🐛 钟

1. 将 🦆 组 🐯 织切成小 🕊 块，放入消化缓冲液中。

2. 在 🌸 37°C 下孵 🐱 育，并定期搅拌 🦁 。

3. 在显微镜 🐞 下监测消化过程，直至组织完全消 💐 化成单细胞悬液。

4. 通 🕷 过过滤去除碎 🐡 片和未消 🌵 化的组织。

使用新 🐧 鲜 🦁 组织。

保持无菌 💐 环境 🦊 。

优化消化条件以 🐡 获得最佳细 🦁 胞活力和产量。

根据组织来源 🕷 和样本大小 ☘ 调 🐳 整消化时间。