神经 🌸 干细胞免疫表型(神经干细胞marker)
- 作者: 李南汐
- 来源: 投稿
- 2025-02-04
1、神经干细胞免疫 🌵 表型 🦆
神经 🌳 干细胞免疫表 🌾 型
神经干 🐈 细胞 (NSC) 表达广泛的免疫表型标 🦟 记,这些标记因物种、发育阶段和分化状态而异。
阳性标记CD133 (PROM1):存在于成人和小鼠胚胎 🕷 NSC 中的跨膜糖 🐘 蛋白
nestin:中间丝蛋白,在神经祖细胞和中 🌳 NSC 表达
Sox2:转录因子,在 NSC 和神经 🌷 祖细胞中表达
Oct4 (POU5F1):转录因 🌼 子,在 NSC 和胚胎干 🦁 细胞 🌷 中表达
Musashi1 (MSI1):RNA 结合蛋白,在 NSC 和 🐟 神经祖细胞中表达
阴性标记GFAP (GFAP):胶质纤维酸性蛋白 🦈 ,在星形胶 🌾 质细 🦁 胞中表达
Olig2:转录因子,在少突胶质细胞 🐒 前体 🐕 细胞 🐎 中表达
MAP2 (MAP2):微管相 🌴 关蛋白,在成熟的神 🐋 经元中表达
βIIItubulin:微管蛋白,在神经元 🌺 中表达
物种差异NSC 免疫表型标记在 🐛 不同 🦟 物种之间存在差异。例 🌺 如在,CD133 啮齿类动物 NSC 中,广 NSC 泛表。达但在人类中的表达较弱
发育阶 🐕 段 🍀 差异
NSC 免疫表型 🕊 也会随着发育阶段而变化。例如,在胚胎发育早 🐝 期,NSC 强烈地表达 Sox2 和而在 Oct4,后。期则表达较弱
分化 🐠 状态差异 🌻
NSC 的分化状 🌲 态也会影响免 🐵 疫表型。例如,神经元前体细胞通常表达βIIItubulin,而胶质细胞前体细胞则表达 Olig2。
应用神经干细胞免疫表型的表征对理解 NSC 生物学和潜在应用至关重要,包 🕷 括:
干 🕊 细胞 🐈 研究:识别和 🌹 纯化 NSC 群体
神经再生:开发 NSC 移植策略以治疗 🌾 神经系统疾病
癌症生物学:研究 NSC 在脑 🐛 肿瘤中的 🦆 作用
2、神 💐 经干细胞marker
早期的神经干细胞标记 🐱 物
Nestin:一种中间丝蛋白 🐛 ,在神经管发育 🌲 期间表达。
Sox2:一 🐺 个转录因子,在神经干 🐈 细胞维持中至关重要。
Oct4(POU5F1):一个转录因子 🦟 ,在胚胎干细胞和 🦟 早期 🦢 的神经干细胞中表达。
Musashi1:一种RNA结合蛋白,在神经干细胞 🐘 的扩增和命运选择中起作 🐺 用。
Prominin1 (CD133):一种跨 🍀 膜蛋白,在神经干 🐞 细胞和肿瘤干细胞中表达。
晚 💐 期的神经干细胞标 🐦 记物
βIIItubulin (Tuj1):一种神经元特异 🌻 性微 🐵 管蛋白亚 🦉 基。
MAP2:一种微管相关蛋白,在神经元中表 🐳 达。
GFAP:一种中间丝蛋白 💐 ,在星形胶质细胞中表达。
Olig2:一种转 🦅 录因 🕷 子,在寡突细胞前体细胞中表 🐘 达。
NG2:一种跨膜 🌲 蛋白,在少突胶质细胞前体细胞中表达。
神经干 🐱 细 🐱 胞表面标记物
CD24:一种糖蛋白,在神经干细胞上表 🐋 达。
CD133:一种跨膜蛋白,在神经干细胞和肿 🐎 瘤干细胞上表达。
CXCR4:一种 🐱 趋化因子受体,在神经干细胞迁移中起作用。
CD15:一 🦉 种糖蛋白,在造血干细胞和神经干细胞上 🐟 表达。
L1CAM:一种细胞 🌴 粘附分子,在神经干细胞迁移和分化中起作 🦍 用。
其他 🌼 神经干细胞标记物
Ki67:一种增殖细 🐝 胞核抗原,在增殖 🦊 细胞中表达。
BrdU:一种 🐞 核苷酸类似物,可用于标记增殖细胞。
EdU:一种类似于BrdU的核苷酸类似物,也可用 🦉 于标记 🌳 增殖细胞。
ALDH1:一 🦆 种醛脱氢酶,在神经干细胞和 🦉 一些肿瘤细胞中表達。
3、神经 💐 干细胞免 🌻 疫荧光
神经 🐴 干细 🐡 胞免疫荧 🐒 光的原理
神经干细胞免疫荧光是一种技 🦆 术 🦊 ,用于可视化和识别神经干细胞。该技术。利,用。抗体与神经干细胞表面或细胞内的特定抗原结合这些抗体与荧光染料偶联当被激发时会发出荧光
步骤1. 制备样本: 神 🌳 经干细胞 🐺 培养物或组织切片被固定 🦋 和透化,以允许抗体进入细胞。
2. 封闭: 加入封 🐅 闭液阻止非特异性 🐯 结合。
3. 一 🦅 抗孵育:加 🐶 入针对特定神经干细胞抗原的一抗。
4. 冲洗:去除未结 🍀 合的一抗 🐱 。
5. 二抗孵育:加入与一抗种属相匹 🐱 配的荧光偶联二抗 🕊 ,该二抗将与一抗 🌺 结合。
6. 再次冲 🐛 洗:去除未结合的 🦟 二抗。
7. 安装:将样本安装在载 💐 玻片上,并用抗荧光淬灭剂进行安装。
应用神经干细胞免 🌲 疫荧光 🌵 广泛应用于:
鉴定神经干细胞: 识别和 🕷 定位神 🐳 经干细胞,研究其分布和迁 🐎 移。
研究神经 🐳 干细胞分化: 追踪神经干细胞分化为神经元、少突胶质细胞和星形胶质 🐯 细胞的过程。
分析神经干细胞移植: 评估移 🐯 植的神经干细胞的存活、迁 🦟 移和分化。
诊断神经系 🌻 统疾病: 检测 🐋 神经干细胞异常,有助于诊断和监测神经系统疾病。
优点特 🐺 异性和灵敏 🦉 度高
可 🕷 同时检测多个抗原
适用于各种样 🐼 品类型,包 🕊 括培养细胞 🌼 和组织切片
可与其他技术结合使 🐞 用,例如共聚焦显微镜和流式细胞术
缺点昂 🌳 贵和 🦍 耗时 💮
抗体特异性可能因批 🐵 次而异
可能出现 🌾 非特异性背景荧光
4、神 🕸 经干 🐶 细胞形态特征
神经干细胞 🪴 的形态 🕸 特征
神经干细胞是一种多能干细胞,具有自我更 🐞 新和分化为神经元、胶质细胞和其他神经元细胞 🦆 的能力。它,们具有。独特的形态特征使其 🌸 与其他细胞类型区分开来
核心 🌿 特征:
大型细胞:神经干细胞比大 🐛 多数其他类型的干细胞更大,直径通常在 1215 微米之间。
独特的细胞核:神经干细胞的 🐬 细胞核通常呈圆形或椭圆形,染,色质松散核仁明显。
高核 🦁 质比:神经干细胞具有高核质比,这是由细胞核相对于细胞质 ☘ 体积大决定的。
缺乏 🐋 突触:神经干细胞缺乏突触和轴突,这与分化的神经 🌷 元不同。
其他特 🌸 征:
不对称分裂:神经干细胞通常以 🌲 不对称的方式分裂,产生一个 🌷 自更新 🐬 神经干细胞和一个前体细胞。
发育阶段特异性形态:神经干细 🍀 胞的形态可以在发育阶段之间变化。例如在,胚,胎,期 🌺 ,它。们可能更呈纺锤形而在成年中枢神经系统中它们可能更 🐶 呈星形
区域特异性形态:神经干细胞的形态也可能因它们 💐 位于大脑或 🌼 脊髓的区域而异。例如脑,室,周。围的神经干细胞通常呈圆形至椭圆形而亚皮层的神经干细胞可能呈锥形
培养条件影响形态:神经干细胞的形态也可以受到培养条件的影响。例如,在神经生长因子 (NGF) 存。在下培养的神经干细胞可能会显示 🐳 出更分化的形态
这些形态特征对于识别和研究神经干细胞非常重要。它们有助于区分神经干细胞与其他细胞类型 🕊 ,并。提 🦆 供有关其功能状态和分化潜能的线索