牙髓干细胞制备扩增流程（牙髓干细胞制备扩增流程图解）

1、牙髓干细胞制备扩增流程

牙髓干细胞制备扩增流程

1. 获取牙髓组织

从健康的拔除牙中提取牙髓组织。

2. 组织消化

使用胶原酶消化酶将牙髓组织分解成单细胞悬浮液。

3. 细胞分离

使用细胞表面标记物（如 STRO1、CD146）进行细胞分选，富集牙髓干细胞。

4. 细胞培养

将牙髓干细胞接种到含生长因子和抗生素的培养基中。

5. 细胞增殖

培养细胞数周，使其增殖并扩增。

6. 扩增传代

当细胞达到 confluency 时，将其传代到新鲜的培养基中。重复此过程以进一步扩增细胞。

7. 质量控制

定期监测细胞生长、分化能力和遗传稳定性。

8. 冷冻保存

将扩增的牙髓干细胞冷冻保存，以备将来使用。

使用无血清培养基或血清替代物以避免血源性污染。

严格控制培养条件以保持细胞的干性。

扩增传代次数限制在 1520 次内，以避免细胞衰老。

牙髓干细胞的异质性可能需要进一步的分选以获得特定的亚群。

2、牙髓干细胞制备扩增流程图解

牙髓干细胞制备扩增 流程图解

1. 牙齿收集和牙髓分离

收集健康的拔除牙

分离牙髓组织

2. 消化和细胞分离

使用胶原酶消化牙髓组织

离心分离细胞

3. 初代培养

将分离出的细胞接种到含有生长因子的培养基中

培养 710 天

4. 细胞悬浮

收集培养的细胞并悬浮在培养基中

5. 扩增培养

将细胞悬液接种到含有生长因子的扩增培养基中

培养 1421 天

6. 细胞收集

收集培养的细胞并离心分离

7. 细胞冻存

将收集的细胞悬浮在冻存溶液中

以液氮温度冻存

8. 扩增后的细胞

扩增后的细胞可用于研究或临床应用，如再生医学或组织工程。

3、牙髓干细胞制备扩增流程视频

牙髓干细胞制备扩增流程视频

牙髓组织

牙髓干细胞培养基

细胞培养箱

1. 获取牙髓

从患者牙齿中提取牙髓组织。

2. 分离牙髓干细胞

使用牙髓干细胞特异性标记物，分离牙髓干细胞。

3. 扩增培养

将分离出的牙髓干细胞接种到牙髓干细胞培养基中，置于细胞培养箱中进行扩增。

4. 细胞计数和传代

定期监测细胞生长，并根据需要进行传代。

5. 鉴定

使用免疫标记或流式细胞术对牙髓干细胞进行鉴定。

步骤 1：准备培养基和培养皿

将牙髓干细胞培养基加入培养皿中。

步骤 2：分离牙髓干细胞

使用标记物将牙髓干细胞与其他细胞分离。

步骤 3：接种细胞

将分离的牙髓干细胞接种到培养基中。

步骤 4：放置培养箱

将培养皿放入细胞培养箱中，温度为 37°C，CO2 浓度为 5%。

步骤 5：监测生长

定期监测细胞生长情况。

步骤 6：传代

当细胞生长达到一定密度时，将其传代到新的培养皿中。

步骤 7：鉴定

使用免疫标记或流式细胞术鉴定牙髓干细胞。

该视频仅提供牙髓干细胞制备扩增流程的。实际操作可能根据具体方法而异。

请咨询合格的专业人员以获取详细指导。

4、牙髓干细胞制备扩增流程图

牙髓干细胞制备扩增流程图

拔除健康的智齿或第三磨牙

无菌取出牙髓

消除污染

干细胞分离

机械分离法或酶促消化法

分离出牙髓干细胞（DSCs）

将 DSCs 接种到培养基中

保持细胞在 37°C、5% CO2 培养箱中

定期换液和传代细胞

免疫表型分析：检测细胞表面标志物，如 STRO1、CXCR4、CD146

多向分化能力：鉴定细胞向牙髓样细胞、成骨细胞和脂肪细胞分化的能力

增殖和存活率分析：评估细胞的增殖潜力和存活率

将扩增的 DSCs 冷冻保存

二甲基亚砜 (DMSO) 作为冷冻保护剂

低温存储在液氮中

牙科再生治疗：修复牙髓病变、促进牙周组织再生

骨再生：修复骨缺损

神经再生：治疗神经损伤