干细胞流式分析哪些（间充质干细胞流式标记国际标准）
- 作者: 陈瑾舟
- 来源: 投稿
- 2024-12-11
1、干细胞流式分析哪些
干细胞流式分析检测以下几个方面的特征：
表面标记：
CD34：造血干细胞和祖细胞的表面标记
CD133：神经干细胞和胚胎干细胞的表面标记
Oct4：多能干细胞的转录因子
Nanog：多能干细胞的转录因子
功能标记：
Annexin V：用于检测细胞凋亡
BrdU：用于检测细胞增殖
Ki67：用于检测细胞增殖
CFSE：用于追踪细胞分裂
其他特征：
体积：用于区分干细胞和分化的细胞
粒度：用于评估细胞内囊泡的数量和大小
复杂性：用于评估细胞表面的复杂程度
通过结合这些标记，流式分析可以区分不同类型的干细胞，研究它们的特征，并监控它们的增殖和分化。
2、间充质干细胞流式标记国际标准
间充质干细胞流式标记国际标准
目的：统一间充质干细胞（MSC）流式标记的标准，确保其表型表征的一致性。
标记物小组：
1. 最小标记物小组
CD73（+）
CD90（+）
CD105（+）
2. 推荐标记物小组
阳性标记物：
CD29（+）
CD44（+）
CD106（+）
CD140b（+）
CD146（+）
CD166（+）
CD271（+）
阴性标记物：
CD14（）
CD19（）
CD34（）
CD45（）
CD79α（）
HLADR（）
3. 附加标记物
这些标记物可用于进一步表征 MSC 亚群或特定来源的 MSC。
CD10（+，肌腱 MSC）
CD13（+，软骨 MSC）
CD20（+，外周血 MSC）
CD31（+，内皮祖细胞）
CD117（+，骨髓 MSC）
CD140a（+，脂肪 MSC）
CD164（+，胎盘 MSC）
CD279（+，血管壁 MSC）
4. 信号强度阈值
阳性：荧光强度大于对照组 2 倍
阴性：荧光强度小于对照组的 1/10
5.gating 策略
细胞碎片和死细胞排除
单细胞群体选择
基于荧光强度阈值进行标记物表达判断
注意事项：
不同流式仪和抗体之间可能存在一些差异。
应始终使用适当的对照（如同种型对照或未标记样本）来设置标记门。
表型表征应与其他特性（如增殖、分化潜能）相结合，以全面表征 MSC。
3、脐带间充质干细胞流式检测
脐带间充质干细胞流式检测
定义：流式检测是一种用于分析细胞群体中不同细胞亚群的仪器技术。脐带间充质干细胞流式检测是一种利用流式细胞术来表征和量化脐带间充质干细胞 (UCMSCs) 的方法。
原理：流式细胞术测量单个细胞的物理和化学特性。UCMSCs 悬浮在液体中，并通过一个液流系统逐个通过一个检测器。检测器使用荧光标记的抗体来识别细胞表面或细胞内的特定标记物。
流程：1. 样本制备： 从脐带中分离 UCMSCs 并制备成单细胞悬液。
2. 标记： 使用荧光标记的抗体标记 UCMSCs 表面或细胞内的特定标记物。
3. 流式分析： 标记的细胞通过流式细胞仪，检测器测量每个细胞的荧光强度和散射特性。
4. 数据分析： 收集的数据用于分析细胞亚群的分布、表型和纯度。
使用的标记物：
UCMSCs 流式检测通常使用以下标记物：
阳性标记物： CD73、CD90、CD105
阴性标记物： CD34、CD45、CD11b、HLADR
应用：脐带间充质干细胞流式检测用于以下应用：
细胞表征： 鉴定并表征 UCMSCs 群体。
质量控制： 确保 UCMSCs 符合国际标准的最小标准。
异质性评估： 确定 UCMSCs 群体内的异质性水平。
研究： 研究 UCMSCs 的生物学特征和分化潜能。
临床应用： 对 UCMSCs 疗法的患者进行监测和跟踪。
优点：快速、准确
可同时分析多个参数
可提供单个细胞水平的数据
用于大规模细胞分析
局限性：可能需要昂贵的设备和试剂
需要熟练的技术人员进行操作
荧光补偿可能很复杂
不能提供细胞功能信息
4、流式和三系诱导都需要做吗
是的，对于需要进行异体移植的患者，通常需要进行流式细胞术和三系诱导。
流式细胞术
用于评估干细胞移植物的质量和免疫表型
有助于检测污染细胞（例如宿主淋巴细胞）和异常细胞（例如白血病细胞）
三系诱导一种程序，旨在恢复干细胞的造血功能
通过将移植物接种到患者体内、给予生长因子和免疫抑制剂来实现
有助于确保所有三系 (髓系、淋巴系和巨核细胞系) 的血细胞功能正常
对于异体移植患者，流式细胞术和三系诱导都是至关重要的程序，以确保成功和安全的移植。
