造血干细胞观察要点(造血干细胞植入效果的检查方法)
- 作者: 马颜宁
- 来源: 投稿
- 2024-12-11
1、造血干细胞观察要点
形态学观察要点
细胞大小:较小,约 1020 微米
细胞核:圆形或椭圆形,染色质细致均匀,核仁明显
胞质:稀疏,淡染,无明显颗粒或空泡
生长模式观察要点
群体生长:成群生长,形成致密的小岛
无贴壁生长:悬浮于培养基中,不贴壁生长
表面标志观察要点
CD34:强阳性
CD117 (ckit):阳性
HLADR:阴性
CD45:弱阳性或阴性
CD38:低表达
功能性观察要点
集落形成能力:能够在培养基中形成集落,包括:
有核集落 (CFUGM):包含粒细胞和巨噬细胞
巨核细胞集落 (CFUMeg):包含巨核细胞和血小板
红系集落 (CFUE):包含红细胞
分化为血细胞的能力:能够分化为各种血细胞谱系,包括:
粒细胞
单核细胞
巨噬细胞
红细胞
血小板
其他观察要点
生长动力学:生长速度较慢,分裂周期约为 2030 小时
抗原性:对不同的人类白细胞抗原 (HLA) 呈弱抗原性或无抗原性
免疫抑制性:能够抑制 T 细胞的增殖和功能
2、造血干细胞植入效果的检查方法
造血干细胞植入效果的检查方法:
血液检查:
全血细胞计数:评估白细胞、红细胞和血小板数量,监测植入后血液恢复情况。
淋巴细胞分析:区分供体细胞和患者细胞,监测移植物宿主病。
血清学检查:检测抗供体抗体、抗原和免疫球蛋白,评估免疫系统反应和植入耐受性。
骨髓活检和细胞学检查:
骨髓穿刺活检:获取骨髓样本,评估细胞形态学、细胞增殖和供体细胞嵌合度。
骨髓细胞学检查:分析骨髓细胞,评估细胞成熟度、增生和移植后异常。
嵌合度分析:
荧光原位杂交 (FISH):利用特定探针标记供体细胞和患者细胞的染色体,确定植入嵌合度。
流式细胞术:利用抗体标记供体和患者细胞的表面抗原,定量分析植入嵌合度。
PCR 方法(如短串联重复序列 (STR) 分析):放大特定基因区域并比较供体和患者 DNA,确定嵌合度。
其他检查:
影像学檢查:如電腦斷層掃描 (CT) 和正子斷層掃描 (PET),評估移植後腫瘤反應或感染。
心電圖:監測心臟功能,植入後可能發生心臟毒性。
肺功能檢查:評估肺功能,植入後可能發生肺部合併症。
監測時間表:
植入效果的監測通常在植入後定期進行,時間表因移植類型和患者情況而異。例如:
前 100 天:每週或兩週進行一次檢查。
100365 天:每月進行一次檢查。
第 1 年後:每 36 個月進行一次檢查。
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3、造血干细胞观察要点是什么
造血干细胞观察要点
形态学:小细胞,直径约 1215 微米
圆形或椭圆形核
细颗粒或嗜碱性胞质
核仁明显
分裂相呈有丝分裂模式
表面标志物:
CD34+
CD133+
CD117+ (ckit)
CD45RA/low
CD71+
CD90+
HLADR
功能:自我更新能力
分化为所有类型的血细胞 (多能性)
长期移植能力
其他特征:
低密度(比重大于 1.073 g/mL)
存在于骨髓、外周血和脐带血中
根据表达的表面标志物可进一步细分,例如 CD34+CD38 细胞
注意: 造血干细胞在不同发育阶段的形态和表面标志物表达可能会发生变化。
4、造血干细胞观察要点有哪些
形态学观察要点:
细胞大小:造血干细胞通常较小(直径约 1015 μm)
核质比:核质比较高,核染色质致密
核形:圆形或椭圆形
胞浆:胞浆清亮,带有少量线粒体和内质网
表面标记:通常表达 CD34、CD133、CD117 等表面标志
细胞化学观察要点:
过氧化氢酶染色(MPO):未成熟的造血干细胞为 MPO 阴性
硫酸酯酶染色(PAS):造血干细胞为 PAS 阳性
碱性磷酸酶染色(ALP):造血干细胞为 ALP 阳性
流式细胞术观察要点:
表面标记组合:通常表达 CD34、CD133、CD117 等表面标志的组合
侧散射特征:造血干细胞的侧散射特征较低
细胞因子表达:可以分析造血干细胞表达的细胞因子,如 GMCSF、TNFα 等
其他观察要点:
群体分选:可以通过流式分选收集特定的造血干细胞亚群
克隆形成试验:培养造血干细胞形成克隆,以评估其增殖和分化能力
免疫抑制活性:造血干细胞具有免疫抑制活性,可以通过抑制 T 细胞增殖来评估