如何冻存 🦄 干细胞 🍀 和细胞（如何冻存干细胞和细胞液的区别）

1、如何冻 🌺 存干细胞和细胞

如 🐧 何冻存干 🦄 细胞 🌼 和细胞

干细胞或 🦟 细 🦆 胞悬液

冷冻培养基（含 🐱 10% DMSO）

无 🌺 菌冷冻保存 🦈 管

泡 🌵 沫聚苯乙烯盒

1. 准备细胞 🦟 悬 🌴 液 🌸

将 🌼 干细胞或细胞收集 💮 至无菌离心管 🌴 中。

离心悬液，去除 🐘 上清液。

用冷冻培养基重 🦉 悬 🌼 细胞 🌾 。

2. 分装细 🐠 胞悬 🐠 液

将细 🌷 胞悬液等分装入无 🌹 菌冷冻保 🐬 存管中。

每管体积不要 ☘ 超过 12 毫升。

3. 冷 🌸 冻 🦟

将冷冻保存管 🌷 缓慢放入预冷 🐛 至 80°C 的异丙醇浴中。

在 80°C 下放 🐬 置 2448 小时 🦊 。

4. 液 🐈 氮 🌼 保存 🦍

将冷冻保存管转移至液氮罐 🐞 中。

确保保存管完全浸没在 🪴 液 🦟 氮中。

5. 运 🐱 输 🌺

如果需要运 🍁 输，请使用经过认证的干冰容器。

将冷冻保 🌷 存管置于泡 🐱 沫聚苯乙烯盒中 🐝 ，周围填满干冰。

复苏时的 🐈 注意事 🦅 项 🐡 ：

快速解 🐠 冻保存管（在 37°C 水浴中约 1 分钟）。

立即用 🌺 预热的完全培养基稀释细胞悬液。

将稀释后的 🪴 细胞悬液缓慢离心，去除 🕷 DMSO。

将细胞重 🐱 悬在完 🐴 全培养基中，用于培 🐳 养或进一步实验。

使用高质量的 🦆 冻 🐛 存培养基以防止细胞损伤。

缓慢冷冻和解冻以最大程度地减少细胞死 🐵 亡。

如果可能，在冻 🐬 存前测试细胞的活力 🐠 。

在处理干细胞或细胞 🌵 时始终保持无菌。

2、如何冻存干细胞和细胞 🐴 液的区别

干细胞冻存和细胞液冻存 🌴 的区别

干细 🐟 胞冻 💮 存：保存干细胞以 🐺 供将来使用，例如再生医学或研究。

细胞液冻存：保存细胞液以供研究或临床应用，例 🐕 如用于细胞培养。

干 🐕 细胞冻 🐴 存 🦍

1. 收集 🦈 干细 🐯 胞 🌸 。

2. 加入低温保 🌷 护 🦢 剂（如二甲基亚砜）以防止细胞 🐼 损伤。

3. 将细胞悬液装入 🌸 冷冻管。

4. 缓 🌹 慢 🕸 下降温度至80℃。

5. 转移至液氮中长期 🐱 储存 🐶 。

细 🕸 胞液 🌺 冻 🦍 存

1. 收集细胞 🦢 液。

2. 加入低 🕷 温 🦁 保 🐈 护剂（如甘油）。

3. 将 🕸 细胞液悬液装入冷 🐘 冻 🦟 管。

4. 快速 🌳 下降温度至80℃（超 🐅 快冷冻）。

5. 转移至液氮 🌾 中短期 🦅 储 🌿 存。

干细胞：储 💐 存在 🕸 液氮中（196℃）。

细胞液：储 🦍 存在液氮中或80℃冷冻机中。

干细胞：可以储存多年，甚至几十 🌿 年。

细胞液：通 🌹 常可短期储存（几个 🌹 月 🦟 ）。

干细胞：缓慢解冻，然后去除低温保护剂 🕸 。

细胞液：快速解冻 🌼 ，然后稀释低温 🐎 保护剂。

干细胞冻存：再生医学（移植、组织修复）、研 🐯 究。

细胞液冻存细胞：培养、蛋、白质 🦁 分析诊断测试。

細 🐴 胞凍存時間：干細胞凍存時間 🐳 較長，而細胞液凍存時間較短。

低溫保護劑濃度 🦊 ：干細胞凍 🐱 存使用的低溫 🍁 保護劑濃度較高，以保護細胞免於受損。

解凍後細胞活力：干細胞解凍後 🐼 通常具有 🐧 較高的細胞活力，而細胞液解凍後細胞活力可能較低。

3、如何冻存 🐒 干细胞和细胞的区 🐅 别

干细胞和细胞 🌷 冻存的 🌳 区别

未分化细胞，具有分化为其他类型细胞的 🐛 潜力。

存储在低温生物库中 🌹 温，度为 🐈 196 摄氏度 (321 华氏度)，使用 🦋 液氮进行冷冻。

冻存前 🦊 通常会与保护剂（例如 🐧 二甲 ☘ 基亚砜或 DMSO）混合，以防止细胞损伤。

冻存后，干，细胞可以 🐵 长时间保持休眠状态然 🦄 后在需要时复苏。

复苏后，干 🌿 细胞可以分裂 🦊 和分化为所 🌺 需的细胞类型。

已分化细胞 🦋 ，具有特定功能。

冻存 🌿 的方 🌲 法与干细胞类似，使用液氮和保护剂。

细胞 🐬 对冻存和复苏过程 🐒 比干细胞更敏感 🦅 。

复 🌸 苏后，细胞 🌻 可能无法恢复其原有 🐞 的功能。

分化 🐞 状态：干细胞是未分化的，而 🐯 细胞是已分化的。

冻存敏感性：细胞比干细胞对冻存和复苏过程更 🐟 敏感。

复苏后的功能复苏后：干，细，胞可以分化为所需的 🐬 细胞类型而细胞可能无法恢复其原有的功能。

干细胞冻存：用 🌺 于储存脐带血细胞、骨 🌻 髓细胞和其他类型的干细胞，以备将来进行治疗或研究使用。

细胞冻存 🐝 ：用于储存配子（精子 🐝 和卵子）、组织样本和其他类型的细胞，以、备研究繁殖或其他目的使用。

4、如 🐦 何冻存干细胞和 🌼 细胞液

干细胞 🌾 冷冻

干细胞培 🐎 养 🌴 物

无 🌺 血清培养 🌿 基

冷 💮 冻 🌾 保存液（DMSO、血清白蛋白、FCS）

80°C 冰 💐 箱

1. 收集干细 🌵 胞：用无血清培养基收集干细胞，并计数细胞数量。

2. 制备细胞悬液：将干细胞悬浮在含有冷冻保存液的无 🦆 血清培养基中细胞。浓。度应符合冷冻保存液制造商的说明

3. 装管：将细 🐈 胞悬液分装到冷冻管中，每个管中装入 12 mL。

4. 缓慢冷冻：将冷 🐠 冻 🌾 管放入一个装有冰的冰桶中，以缓 🍀 慢冷冻细胞以。每分钟 1°C 至的 3°C 速。度冷冻

5. 转 🐋 移至 80°C 冰箱：当 80°C 细胞悬液达到时，将 80°C 其转移至冰箱中储存。

6. 长期 🐳 储存：当需要长期储存时，将 🐱 细胞悬液转移至液氮罐中。

细 🐺 胞 🕷 液冷冻 🐟

细胞 🌻 液样本 🐠

无 🌿 血清培 🦁 养基或 🦢 PBS

冷冻保存液（DMSO、血清白蛋白 ☘ 、FCS）

80°C 冰 🐦 箱 🐟

1. 制备细胞液：收集细胞培养物中的细胞液，并用无血清培养 🐘 基或 PBS 洗涤 🐋 。

2. 制备细胞液悬液：将细胞液悬浮在含有冷冻保 🕷 存液的无血清培养基或 PBS 中细胞液。浓。度应 🦢 符合冷冻保存液制造商的说明

3. 装管：将细胞 🐎 液悬液分装 🕊 到冷冻管中，每个管中装入 12 mL。

4. 缓慢冷 🦍 冻：将冷冻管放入一个装有冰的 🐅 冰桶中，以缓慢冷冻 🌼 细胞液以。每分钟 1°C 至的 3°C 速。度冷冻

5. 转移至 80°C 冰箱：当 80°C 细胞液悬液达到时，将 80°C 其转移至冰箱 🌴 中储存。

6. 长期储存：当 🐺 需要长期储存时，将细胞液悬液转移至液氮罐中 🦁 。

注 🐡 意事项：

使 🐼 用高质量 🐦 的 🌷 冷冻保存液。

仔 🐶 细 🍁 遵循制造商的说明。

缓慢冷冻和解冻细胞以最 🐳 大限度地提高存活率。

解 🌺 冻细胞时，应使用加热水浴或解冻培养 🐒 基 🌷 箱。

冷冻和 🐳 解冻后应尽 🦊 快使用细胞。