干细胞表型检测 🐧 有哪些(干细胞鉴定中表面标志物 🐱 有哪些)
- 作者: 朱奕南
- 来源: 投稿
- 2025-03-06
1、干细胞表型 🐬 检测有哪 🪴 些
干细胞 🦁 表型检 🐬 测 🌺 方法
1. 流式细 🦢 胞 💮 术分 🕷 析
检测 🌺 细胞表面 🌲 的抗原表达。
使用荧光标记抗体,结合到特定的细胞表面 🪴 标记物上。
检 🦅 测细胞与抗体 🌲 结合的荧光 🦋 强度和分布。
2. 免疫 🌴 组化
检 🌺 测细胞内的抗原表达。
使用 🐘 抗体对细胞进行染色,然后用显微镜观察。
可以根据染 🦉 色强度和模式评估抗原表达水平。
3. 微阵 🦍 列分 🐎 析 🍀
检测大量 🕷 基 🦢 因的表达 🐝 水平。
使用探针与目 🦁 标 RNA 杂 🌼 交,然后检测荧光信 🌲 号强度。
可 🐴 以同时分 🌻 析数百或数千种基因,获 🐘 得基因表达谱。
4. 实时荧光定 🕊 量 🦊 PCR(qPCR)
检测 🌿 特 🐝 定基 🦟 因的表达水平。
使用荧光标记引物,检测 🪴 PCR 扩增过程 🦉 中 🕊 的荧光信号积累。
可以定量分析基因 🌻 表达水平 🦄 。
5. 甲 🦈 基化 🕸 分 🐼 析
检测 DNA 甲 🐯 基化模 🐝 式 🦅 。
使用甲基化 🌼 特异性核酸内切酶或化学试剂处理 DNA,然后进行或 PCR 测序。
可以评 🐅 估特定基因或基因组区域的甲基化水平。
6. 转 🌿 录组 🐈 测序 🦋 (RNASeq)
检测所有转录 RNA 分 🌸 子的表 🐵 达水平 🦊 。
将 RNA 提取物转化为 cDNA 文库,然后进行测序 🌸 。
可以深入了解基因表达调控 🌾 和细 🦁 胞状态。
7. 单细胞 🍁 RNA 测序(scRNASeq)
检 🐞 测单个细胞的转录组 🦈 。
将 🌷 细胞分离为单个细胞,然后提取 RNA 进行测序。
可以表征细胞异 🐈 质性 🐵 、识别细胞亚群。
8. 蛋白质 🌻 组学 💮 分 🦢 析
检测细胞内的蛋白质表达水平和修 🐟 饰。
使用质谱或抗体阵列技术,分析蛋白质 🐶 表达谱和翻译后修饰。
2、干细胞鉴定 🐘 中表面标志物有哪 🐠 些?
胚 🐵 胎干 🦢 细 🐺 胞 (ESC)
Oct4 (POU5F1)
Sox2
Nanog
SSEA4 (CD8)
TRA160 (CD105)
TRA181 (CD141)
诱导多能干 🌷 细 🐒 胞 (iPSC)
Oct4 (POU5F1)
Sox2
Klf4
cMyc
SSEA4 (CD8)
TRA160 (CD105)
TRA181 (CD141)
间充质干细 🦄 胞 💐 (MSC)
CD73
CD90
CD105
CD166
CD271
CD44
CD106
STRO1
神 🐈 经 🐎 干细 🌸 胞 (NSC)
Nestin
SOX2
Musashi1
CD133 (PROM1)
GFAP (Glial fibrillary acidic protein)
BLBP (Brain lipidbinding protein)
造 🐈 血 🐕 干细胞 (HSC)
CD34
CD133 (PROM1)
CD38
CD45RA
CD45RO
CD90
Lin (Lack of lineagespecific markers, such as CD3, CD19, CD11b, CD14, CD16, and CD20)
其 🐧 他干 🐞 细胞 🕊
外胚层 💮 干 🦊 细胞 (EESC)
Nestin
SOX2
CD34
CD133 (PROM1)
CD117 (cKit)
中 🌼 胚层干细 🕸 胞 (MSC)
CD29
CD44
CD54
CD90
CD105
CD166
CD271
内胚层干 🪴 细胞 (ENDSC)
SOX17
CXCR4
CD326 (EpCAM)
CD24
CD271
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3、干细胞表型检测有 🦟 哪些方法
干细胞表型检测 🐘 方法 🐱
基于荧光标记的方法 🐈
流式细胞术 (FACS):使用 🐼 荧光标记的抗体识 🦉 别特定表面或胞内抗原。
显微镜检查:使用荧光染料或标记抗体,在显 🦆 微镜下可 🐡 视化细胞表型。
免疫组化:使用酶联或标记抗体,对固定细胞或组织 🦆 切片进行免疫染色。
基 🐶 于基因表达的方法 🌿
实时 🦉 定量 PCR (qPCR):测量特定基因的 mRNA 表达水平。
RNA 测序 (RNASeq):分 🦟 析整个转录组,包括 mRNA、非 RNA 编码和剪接变异体。
功能 🐬 性 🦆 检 🐧 测
分化潜 🐳 能分析:通过适当的诱 🌼 导条件,评估干细胞分化为特定细胞类型的能力。
增殖测定测:量干 🦉 细胞在特定条件下的增殖速率 🦋 。
迁 🌵 移测定:评估干细胞对 🐝 特定刺激的迁移动力。
其他方法表面标记分析:使用非标记抗体 🕷 与表面受 🦢 体结合,然后通过化学或物理方法进行检测。
细胞周期分析:通过 🌵 染色或荧光标记 🐝 ,确定细胞 🕊 的细胞周期状态。
凋亡检测:评估细胞是 🌹 否经历 💮 凋亡过程 🍁 。
4、干细胞表型 🐶 检测有哪些项目
干细胞 🐡 表型检测项目 🦟
表面标 💐 志物检测:
群体标志物 🐴 (如 CD34、CD38、CD45、CD105、CD90)
系谱 💮 标志物 🦄 (如 CD11b、CD14、CD19、CD20)
活化 🐠 /分化标志物(如 CD25、HLADR、CD71、CD62L)
形态 🦢 学检测:
细 🐠 胞 🐱 大小和形状
核 🐵 /细胞质 🐺 比
细 🍁 胞 🍁 粒结构 🐈
细 🌼 胞 🕸 附 🐦 着性
增 💮 殖 🐡 能力检测:
克隆形成能力试验 🐡 (CFU)
球体形成 🦄 能力 🌺 试验
细胞增殖测定 🕊 (如 MTT、BrdU 掺入)
分 🐺 化能 💐 力检测:
多 🦢 向分化潜能检测(如体 🐎 外三胚层分 🪴 化)
系谱特 🌲 异性分化检 💐 测(如成骨分 🐼 化成、软骨分化成、血管内皮分化)
免 🍁 疫表型检测 🐟 :
免 🐺 疫 🐠 荧光染 🌷 色
流式 🐒 细胞术 🌸
多 🌷 重免疫组织化学染色
其 🐋 他检测 🐳 :
基因表达 🐋 谱分 🐛 析(如 RNA 测序)
甲 🐵 基化分析
表观遗传 🌺 修 🌾 饰分析
代谢组学 🐘 分析 🐶