鉴 🌹 定组织中的干细胞(组织干细胞和 🐋 生殖干细胞的定位和主要标志物)
- 作者: 马珺朵
- 来源: 投稿
- 2025-03-20
1、鉴定组织中的干细胞 🐋
鉴 🐎 定组织中的干细胞
1. 显微镜 🕷 观察:
观察细胞 🌼 的形态、大小和组织结构。
干细胞通常具有特定的形态,如 🐼 圆形、梭形 🦋 或多 🐕 边形。
它们可能具有较大的细胞 🦟 核相对于细胞质的比例。
2. 免疫 🐒 组化:
使 🐦 用抗体 🦋 检测细胞表面或细胞内的特有蛋白 🐳 。
干细胞特异性标记包括 CD34(造血干 🐘 细胞)、CD133(神经干细胞)、Oct4(胚胎干细胞 🦁 )。
3. 流式 🌺 细 🐡 胞 🌸 术:
分析 🦋 悬浮细胞群中不同细胞 🕸 群的相对丰度。
基于细胞大 🐈 小、颗、粒性荧 🦅 光标记等物理和化学特性分离细胞。
干 🌺 细胞 🐎 通常具有独特的散射和荧光特征。
4. 克隆形 💮 成 🌳 试验:
将单 🐠 细胞或 🕷 少量细胞接种到合适的培养基中。
形成克隆的细胞具有自我更新 🐞 和多向分化能力,这表明它们 🐵 是干细胞 🌴 。
5. 分 🐶 化潜 🦢 能 🐼 检测:
将干细胞培养在不同的条件下 🦋 ,诱导 🦈 它们分化为特 🐺 定的细胞类型。
分化潜能的范 🐶 围取决于干细胞的类型和发育阶段。
6. 转 ☘ 录 🕸 组 🐴 学分析:
分析干细胞的基 🦅 因表达 🐦 谱 🦟 。
干细胞具有独特的基因表达特征,与 🐴 分化 🌿 的 🐝 细胞不同。
7. 表观遗 🦢 传 🕸 学分析:
研究干细 🐞 胞的DNA甲基化和 🐳 组蛋 🕸 白修饰模式。
干细胞具 🌳 有特定的表观遗传特征,与分化的细胞不同。
8. 功能 🍀 分析:
评估干细 🌾 胞的自更新、增殖和分 🐅 化能力。
这 🐝 些功能对于干细胞的鉴定和表征至关重要。
9. 体内模 🦆 型 🐅 :
将干细胞移植到动物模型中,并监测它们的存 🐘 活、分化和再生能力。
这提供了评估干细胞在复 🌼 杂环境中 🐅 的功能的更有力的证据。
2、组织 🐋 干细胞和生殖干细胞的定位和主要标志物
组织 🐴 干细胞
| 组织 | 干 | 细 🐋 |胞定位主要标志物
||||| 血液 🐅 | 骨髓 | CD34+, Lin, CD38 |
| 上皮上皮 🍀 | 基底 🍁 层 | CK5/6+, CD49f+ |
| 间质 | 血管周 🕷 围区域 🐒 | CD44+, CD105+, CD166+ |
| 神 🍀 经 | 嗅球、海马体 🐅 | Nestin+, GFAP+ |
| 肌肉 🐛 肌 🦉 | 卫星细胞 🕷 | Pax7+, Pax3+ |
| 骨 🌷 骨 | 膜骨、髓 | CD45, CD34+, Stro1+ |
| 脂肪 🐳 | 白色脂 🐋 肪、棕色脂肪 | PPARg+, FABP4+ |
| 皮肤 | 毛囊凸起 🐘 | CD34+, K15+ |
生殖干 🐋 细胞 ☘
| 类型 | 定 🌸 | 位 |主 🐴 要标志物 🐯
||||| 雄性精原干细胞 🦁 | 睾丸曲细 🐵 精 🦢 管基底层 | Gfra1+, Plzf+ |
| 雌性卵母干 🐱 细胞卵 🐦 | 巢皮质 | FOXO3a+, Oct4+ |
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3、干细胞鉴定中表面标志物有哪些 🐟 ?
胚胎干细胞 🌴 表面标志物
Oct4 (POU5F1)
Sox2
Nanog
SSEA1
SSEA3
SSEA4
TRA160
TRA181
诱 🦍 导多能干 🐵 细胞表面 🌿 标志物
Sox2
Oct4
Klf4
cMyc
SSEA3
SSEA4
间充质干细胞表面 🌷 标志物
CD29
CD44
CD73
CD90
CD105
CD166
血管祖细胞表面标志 🐞 物
CD34
CD45
CD117 (cKit)
CD133
Flk1 (KDR)
神经干细胞表面标志 💐 物 🌷
CD133
Nestin
Sox2
GFAP
O4软骨细胞表 🌺 面标志物
CD44
CD90
CD105
CD166
Sox9
脂肪 🐳 细胞表 🦁 面标志物
CD29
CD34
CD44
CD90
CD105
CD166
肝脏 🐠 干细胞 💮 表面标 🐺 志物
CD34
CD44
CD90
EpCAM
CD133
胰 🐳 腺干 🐬 细胞表面标志物 🦅
CD24
CD29
CD34
CD44
CD133
4、鉴定组 🕊 织中的干细胞是什 🦍 么
干细胞鉴 🌲 定 🐱
鉴 💐 定组织中的干细胞涉及 🐼 评估其特征性标志和行为:
膜 🌺 表 🕸 面标志:
CD34+:造 🐎 血干 🌾 细胞 🐱
CD133+:神 🐦 经干细 🐋 胞 🐦
CD90+:间充 🐡 质干细胞 🐛
细胞 🦄 内 🌷 标 🐠 志:
Oct4、Sox2、Nanog:胚胎干 🌾 细胞
Nestin:神经干细 🐼 胞
CD49f:间 🐱 充质干细胞
功能性特 🐴 征 🐯 :
自我更新:能够复制自身并维持 🦁 干细胞库
多能 💮 性:分化为多种特定细胞类型 🐟 的能力 🐳
成瘤性:在合适的条件下形成肿瘤的能力(仅胚 🦅 胎干 🐛 细胞和诱导多能干 🦍 细胞)
其他 🐼 检测方法:
流式细 🐴 胞术:使用抗体标记 🐕 膜表面抗原
免疫 🌵 组织化 🐵 学 🦋 :检测细胞内抗原
单细胞 🐞 RNA测序 🦅 :表征基因表达谱
功能性测定:例如分化潜能或克隆 🐳 形成 🌻 效率
组 🌵 织特异 ☘ 性标 🐠 志:
鉴定特定组织中的干细胞可能需要 🐶 额外的组织特异性标志。例如:
肝 🕷 脏 🌻 干细胞:HepPar1(+)
肠 🦉 道干 🐦 细胞:Lgr5(+)
皮肤干细胞 🐬 :CD34(+)、CD166(+)
注意 🐅 事 🌺 项:
干细胞的鉴定可能具有挑战性 🌴 ,因为它们经常与其他细胞类型共存于组织中。
不同技术 🌻 的组合通常用于提高准确性 🦉 。
干细 🦁 胞标记在不同的组织类型 🐺 和发育阶段之间可能会有所不同 🦢 。