DMSO干细胞冻存液（dmso干细胞冻存液）
- 作者: 王洛屿
- 来源: 投稿
- 2025-01-08
1、DMSO干细胞冻存液
二甲基亚砜 (DMSO) 干细胞冻存液
定义：一种用于冷冻保存干细胞的特殊溶液，含有高浓度的二甲基亚砜 (DMSO)。
目的：保护干细胞免受冷冻损伤，包括细胞膜破裂和冰晶形成。
维持细胞存活率和功能。
成分：二甲基亚砜 (DMSO)： 一种渗透 cryoprotectant，有助于脱水细胞并防止冰晶形成。
其他 cryoprotectant： 如丙二醇、甘油或葡萄糖，提供额外的保护。
培养基： 干细胞的生长培养基，含有必需的营养物质和因子。
使用方法：
1. 干细胞悬浮在 DMSO 干细胞冻存液中，浓度通常为 510%。
2. 将细胞悬液转移到冷冻管或小瓶中。
3. 将冷冻管缓慢冷冻，每分钟下降 12°C，直到达到 80°C。
4. 将冷冻管转移至液氮罐中长期储存。
优点：优异的细胞保护，确保高存活率和功能性。
细胞长期储存的稳定性。
相对简单的冻存和解冻过程。
缺点：DMSO 可能会在解冻后对细胞产生毒性。
解冻过程必须仔细进行，以避免细胞损伤。
DMSO 会降低细胞增殖率，因此在解冻后进行细胞培养时需要额外注意。
2、dmso干细胞冻存液
DMSO 干细胞冻存液
DMSO（二甲基亚砜）是一种有机溶剂，通常用于保存活细胞和组织。它是干细胞冻存中常用的冷冻保护剂。
组成：DMSO 干细胞冻存液通常由以下成分组成：
DMSO：一般为 510% v/v
培养基：如 DMEM、MEM 或 RPMI
血清：如 FBS 或 HS
其他成分：如抗生素、生长因子和 cryoprotectant
作用原理：
DMSO 具有以下作用：
降低冰点：DMSO 可降低液体的冰点，防止细胞在冷冻过程中形成冰晶。
渗透性：DMSO 可穿透细胞膜，进入细胞内。
替代水： DMSO 可与细胞内的水分子发生氢键，形成氢键键，取代细胞内的水分子。
稳定蛋白质和脂质： DMSO 可稳定细胞内的蛋白质和脂质，防止其在冻融过程中变性。
使用：DMSO 干细胞冻存液用于将干细胞悬浮在冻存液中，然后逐渐降低温度，直到细胞冻结。冻结后，细胞可长期保存在液氮中。
注意事项：
DMSO 对细胞有毒性，因此需要在使用前稀释。
冻存液的成分和制备方法应根据特定的细胞类型进行优化。
在冻融过程中应小心操作，以避免细胞损伤。
冻存液应保存在无菌条件下，以防止污染。
3、干细胞冻存液配制步骤
干细胞冻存液配制步骤
材料：干细胞悬液
冻存液：含二甲基亚砜 (DMSO)，通常为 10% 或 20%
无菌冷冻管
步骤：1. 准备干细胞悬液
计数干细胞并调整细胞浓度为所需的浓度。
将细胞悬液离心收集细胞。
2. 加入冻存液
向细胞悬液中缓慢加入冻存液，轻轻振荡。
对于 10% 冻存液，通常以 1:9 (冻存液:细胞悬液) 的比例加入。
对于 20% 冻存液，通常以 1:4 (冻存液:细胞悬液) 的比例加入。
3. 缓慢降温
将细胞悬液转移到无菌冷冻管中。
将冷冻管放入装有异丙醇的冷冻盒中。
以每分钟 12°C 的速度缓慢降温，直至 80°C。
4. 液氮保存
将冷冻管移至液氮罐中保存。
确保冷冻管完全浸入液氮中。
注意事项：
使用高质量的冻存液，以防止细胞损伤。
避免过度降温，因为这会导致细胞死亡。
冻存过程中请勿剧烈振荡，以免损坏细胞。
将冷冻管清晰标记，包括细胞类型、冻存日期和浓度。
4、干细胞冷冻保存费用
干细胞冷冻保存的费用因以下因素而异：
细胞类型：自体干细胞冷冻保存比异体干细胞冷冻保存更昂贵。
储存地点：公共库比私立库便宜。
储存期限：长期储存比短期储存更昂贵。
其他成本：如采集和加工费用。
以下是不同情况下干细胞冷冻保存的估计费用：
公立库自体干细胞：2,0005,000 美元
存储费：每年 50200 美元
私立库自体干细胞：1,5003,000 美元
存储费：每年 100300 美元
其他费用采集费：5001,500 美元
加工费：5001,000 美元
总体而言，干细胞冷冻保存的总成本在以下范围内：
自体干细胞：3,00010,000 美元
异体干细胞：2,0006,000 美元
请注意：这些只是估计值，实际费用可能会有所不同。在进行干细胞冷冻保存之前，建议与多个库联系并比较成本。
