皮肤成纤维细胞是干细胞（人皮肤表皮干细胞及成纤维细胞的分离培养）
- 作者: 杨桉闻
- 来源: 投稿
- 2025-01-12
1、皮肤成纤维细胞是干细胞
错误。皮肤成纤维细胞不是干细胞，而是分化的，不能自我更新或分化为不同类型的细胞。
2、人皮肤表皮干细胞及成纤维细胞的分离培养
人皮肤表皮干细胞及成纤维细胞的分离培养
1. 材料与试剂
材料：健康人皮肤样品
无菌手术器械
无菌组织培养皿
冻存管冰盒
试剂：
胰蛋白酶（0.25%）
胶原酶 IV（1 mg/mL）
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM)
胎牛血清（FBS）
上皮细胞生长因子（EGF）
转化生长因子α（TGFα）
青霉素/链霉素溶液
2. 组织样品的采集
消毒采集区域。
使用无菌手术器械从健康人皮肤上切取一小块表皮（约 1 平方厘米）。
将组织样品转移到装有无菌 DMEM 的冰盒中。
3. 表皮干细胞的分离
将表皮组织切碎成小块。
加入含有胰蛋白酶的 DMEM，在 37°C 下孵育 2 小时。
过滤组织悬液以去除未消化的组织块。
离心收集细胞，并在含有 FBS 的 DMEM 中重悬。
4. 成纤维细胞的分离
将剩余的真皮组织切碎成小块。
加入含有胶原酶 IV 的 DMEM，在 37°C 下孵育 4 小时。
过滤组织悬液以去除未消化的组织块。
离心收集细胞，并在含有 FBS 的 DMEM 中重悬。
5. 细胞培养
表皮干细胞：
将表皮干细胞接种到含有 EGF 和 TGFα 的无血清培养基中。
每 34 天更换培养基。
成纤维细胞：
将成纤维细胞接种到含有 FBS 的 DMEM 中。
每 23 天更换培养基。
6. 细胞冷冻保存
当细胞达到 8090% 的汇合度时，用胰蛋白酶消化。
离心收集细胞，并用含 10% FBS 和 10% DMSO 的 DMEM 重悬。
以每毫升 100 万个细胞的密度分装到冻存管中。
将冻存管置于 80°C 的超低温冰箱中，或液氮罐中冷冻保存。
7. 应用
皮肤组织工程
烧伤和创伤修复
抗衰老研究
药物开发
3、皮肤成纤维细胞是干细胞还是湿细
湿细胞4、皮肤成纤维细胞是干细胞嘛
不，皮肤成纤维细胞不是干细胞。
皮肤成纤维细胞
结缔组织细胞类型
产生真皮层中胶原等细胞外基质成分
不具备自我更新和分化成其他细胞类型的能力
干细胞具有自我更新和分化成多种细胞类型的能力
可以分化成组织和器官中的专门细胞
可分为多能干细胞（胚胎干细胞和诱导多能干细胞）、少能干细胞（造血干细胞等）和祖细胞
