成体干细胞分离与鉴定（成体 🦆 干细胞活体鉴定）
- 作者: 胡芊洛
- 来源: 投稿
- 2025-04-02
1、成体干 🐞 细胞分离与鉴定
成体干 🐡 细 🌳 胞分离与鉴定
分离机械分离：基于细胞大小、密度和粘附特性，使、用离心过滤 🌺 或 💐 免疫磁珠。
荧光激活 🐼 细胞分选 (FACS)：使用表面标记识别和分离特 🐦 定干 🐵 细胞亚群。
组织培 🐵 养培养组织：样本 🦋 ，允许干细胞从支持细胞中生长和增殖。
鉴定形态学 🐅 评估：观察细胞形 🌲 态和增殖模式。
免疫 🕷 表型分析：使用抗体检测细胞表面 🐱 标记 🐅 ，如 CD34、CD133 和 Sca1。
克隆形成试验：评估干细 💐 胞形成克隆或 🦅 集落的能力。
分化潜能试验：诱导干细胞向不同细胞系分化，例如 🍁 脂肪、骨骼或软骨。
基因表达分析：通过 RTPCR 或微阵列检测干细胞 🍀 特异性基因的 🍁 表 🍀 达。
具体 🐛 方法 🦈 示例
骨髓 🦉 间充质干细胞分 🦈 离 🌵 ：
密度梯度 🐱 离心：分离单 🌹 个核细胞。
免疫磁珠 🌵 分离：使 🌼 用 CD105 和 CD73 抗体选择性分离间充质 🌲 干细胞。
脂肪组织来源 🦉 的间充质干细 🦋 胞分离：
胶原酶消 🍀 化：释放细 💐 胞 🌷 。
离心：去除 🐠 脂肪。
贴 🕷 壁筛选 🐺 选：择性 🕷 培养间充质干细胞。
神经 🦉 干细胞分离 🐺 ：
免疫磁珠分离：使用 Nestin 抗体分离 🕸 神经 🍀 干细胞。
FACS：使用 CD133 抗体 🐦 分离神经 🐯 干细胞 🌼 。
鉴定注 🐬 意事项
不同的干细胞来源和 🦊 类 🌿 型需要特定的鉴 🐅 定方法。
表面标记可能会发生 🐯 变化，因此需要多种鉴定方法。
干细胞可能 🍁 具有可塑性，因此在不同条件下可能会表现出差异。
2、成 🐋 体干细胞活体 🦈 鉴定
成体干细 🐘 胞活 💮 体鉴定
成体干细胞活体鉴定是确定细胞是否具有干细胞特性的关键步骤。它可以区分干细胞和其他类型细胞，并。允许 🌵 研究人员监测随着时间的 🕷 推移干细胞的特性
方法1. 克隆形 🐅 成试 🦆 验 (CFA)
将单个细胞或少量细胞接种至培养基中培养，成 🌼 无血清基质细胞 🌼 群体。
生成的群体（克隆）表明细胞具有 🐬 自我更新能力。
2. 悬 🌿 浮 🕷 培养 🌿
将 🌷 细胞培养在 🍀 无基质的培 🐅 养基中，使其形成细胞团或球体。
球体的形成表明细胞具有自我更新和 🦉 分化潜能。
3. 标 🦋 记保 🐬 留试验 🦅
将细胞用富含重同位素的培 🐳 养基培养，然后转移到普通培养基中。
培养时间后，仍保留标记 💮 的细胞表 🕷 明具有长期自我更新能力。
4. 异 🐠 种 🌿 移植 🐴
将细胞移植到免 🌵 疫缺 🦄 陷小 🐝 鼠体内。
移植后发现与原细胞类型相 🕸 似 🐞 的组织产 🍀 生，表明细胞具有多能性。
5. 流 🪴 式细胞术
使用特定表面标记检 🐘 测细胞表面抗原，这些抗原与干细 🌾 胞相关。
此方 🐘 法可以分离 🦁 和富集干细胞群体。
6. 干细 💐 胞谱系分析
对细 🌾 胞进行培养并诱导分化成特定谱系（例如，神经元 🍀 成、骨细 🌿 胞）。
观察谱 🐟 系特异性标记的表达表明细胞具有分化潜能。
注意事项不同类型的干细胞具 🌾 有不同的鉴定方法。
单一试验不足 🐞 以确定干细胞性，必须结合多种方 🕊 法。
结果受细胞培养条件、基质和培养 🕸 基 🪴 成分的影响。
应用干细 🐵 胞活体鉴定对于 🦉 以下应用至关重要：
干 🐧 细胞研究 🦆 的基本科学
组织工程 🪴 和再 🍀 生医学
药 ☘ 物筛 🦊 选和毒性测试
开发基于干细 🌻 胞的疗法
