厂家干细胞制作工艺(干细 🐶 胞提取方法和设备)
- 作者: 郭初温
- 来源: 投稿
- 2025-02-07
1、厂家干细胞 🌲 制作工 🦄 艺
厂家干细 💮 胞制作工艺
1. 样 🌴 品 🐈 采 🐴 集
从捐献者或患者身上采集 🐎 血液、骨髓或组 🐳 织 samples。
2. 细胞分 🌳 离 🦆
利用各种方法提取 stem cells,例如密 🦢 度梯度离心或磁性细胞分选。
3. 细胞培 🌻 养
在无菌环 🌷 境下,将 stem cells 培养在富含营养物质的培养 🦈 基中。
通过传代培养,扩增细 🕸 胞 🐈 数量。
4. 细胞 🐋 表 🌹 征 🐈
使用免疫表型、细胞标记和基因表达分析来验证细胞 🦆 株的特性和身份 ☘ 。
5. 细 🐕 胞 🐒 冻存 🦋
为了长期保存,将细 🐠 胞悬浮在含 DMSO 的冷冻保护液中。
细胞在超低温下 🌳 (80℃ 或液氮中 🌸 )冻存。
6. 细 🦄 胞分化(可 🌹 选 🐡 )
根据 🐝 需要,可以对 stem cells 进行分化为特定细胞类型。
利用生长 🦊 因子、细胞因子和其他因素诱导分化。
7. 质 🐟 量 🌲 控制 🦊
在整个过程中进行严格的质量控制 🦈 ,以确保细胞的安全性、有 🐦 效性和合规性。
检 🦋 测包括微生 🦊 物、内毒素和遗传稳 🦁 定性。
8. 产品 🌸 发布
满足所有监管 🐟 要求后,将细胞产品 🦉 释放用于研究或临床应用。
影响因素细 🌷 胞 🐅 来源
培养基 🐞 成 🐦 分
培 🐡 养 🐺 条 🕊 件
下游应 🕷 用 🌾
优势大规 🐦 模 🦍 生产 stem cells 的能 🐴 力
标准 🐯 化 🦅 的工艺 🐳 ,确保产品一致性
确保细胞 🐱 质 🐺 量和安全性的监管合规性
2、干细胞 🐠 提取方法和设备
干细 🦟 胞提取方法 🐺
1. 组 🐱 织培 🌼 养 🦟 :
从组织(如骨髓、脂肪或脐带血)中分离 🍁 细胞。
在富 🌸 含生长因子的培养基中培养细胞,使其增殖和分化。
通过免疫标记或其他技 🐧 术分离 🦢 出目标 🐼 干细胞。
2. 离 🍀 心 💮 :
利用离心机将密度不同的细胞分层 🦢 。
干细胞通常 🐴 位于特定的密度 🐅 层。
收集目标密度层的细胞 🪴 ,进行进一步分离。
3. 分 🦢 选 🌷 :
使用荧光激活细胞分选仪(FACS)或磁性激活细胞分选(MACS),根据特定表面标志 🌲 或其他特征分选出干细胞。
将抗体标记到靶向表面 🌷 标 🌹 志,并通过仪器分选出结合抗体的细胞。
4. 微流体 🐘 :
利用微流体装置,通过微通道的流变特性分 🐡 选干细胞。
利用大小、电荷或 🌹 其他物理特性,分离出特定 🌳 大小或特性的细胞 🐅 。
干细 🐺 胞提取设备
1. 组 ☘ 织培养箱:
提供受控的环境 🦄 ,用 🐵 于培养和增殖干 🌲 细胞。
调节温度 🐬 、湿度和二氧化碳水平。
2. 离 🦁 心 🦅 机 🐈 :
用于将细胞悬 🕸 液分 🐬 层 🦋 。
不同的转速和离 💐 心时间用于分离不同密度的细胞。
3. 分 🌲 选仪 🐠 :
荧光激活细胞分选仪(FACS):使用荧光标记抗 🐧 体分选细胞。
磁 🕊 性激活细胞分 🐶 选仪(MACS):使用磁珠结合抗体分选细胞。
4. 微流体装置 🐒 :
微小的芯片,采用微通道将细胞悬液分选为 🌳 不同的亚群。
利 🐎 用电场、声场或其他物理力分选细胞。
5. 细胞 🦍 计数 🦋 器 🕊 :
用于 🦁 计 🪴 数和分析细胞悬液中的细胞数量和活力。
保证提 🐱 取过程中的细胞存活率 🕷 和 🕸 纯度。
6. 冷 ☘ 冻 💐 装置 🌸 :
用于储存干细胞,保持 🌸 其活性。
使 🐱 用液氮或其他冷 🐦 冻技术,以低温 🌾 保存细胞。
3、植物干细胞生 🌿 产厂家
国内植物干细胞生 🍀 产厂家
中科 🕸 院植物研究所
华 🌺 南 🦆 农业 🐞 大学
浙 🕸 江大学
南京农业大 🐎 学
中国 🌸 农业科学院
华中 🐴 科 🐡 技 🪴 大学
上 🐡 海 🐵 交通大学 🦅
北 🐴 京大 🐦 学 🌻
复旦 🐼 大学
上海师 🍁 范大学
国外植物干细胞 🌿 生产厂家
Mibelle Biochemistry(瑞 🐠 士 🪴 )
Explant Labor(德 🐶 国 🐒 )
Biotechnological Institute(瑞 🐼 士)
PhytoCellTec(瑞 🕊 士)
Sytheon(美 🐎 国 🦄 )
Indena(意 🦉 大 🦊 利 🐵 )
L'Oréal(法 🪴 国 🐶 )
Estée Lauder(美 🦍 国 💮 )
Clinique(美 🌿 国 🐋 )
Lanc?me(法 🦈 国 🌲 )
4、干细胞制 🐱 备 🌳 工艺流程
干细胞制备 🐛 工艺流 🦟 程
1. 细胞 🐝 采 🐵 集 🌼
骨髓 💐 穿刺 🌳
外周血 🦅 采集
脐 🌼 带血采 🌳 集 🌲
2. 细 🐯 胞 🐟 分离 🦊
Ficoll 密 🦊 度梯度离心 🕸
磁性 🐵 细胞分选
荧光激活 🦊 细 🐶 胞分选(FACS)
3. 细胞培 🌳 养 🕷
无血 🦋 清 🌹 培养基 🦉
添加生长 🐯 因子或细胞因子
维持适当的 🐱 温度 💐 、pH 值和气体环境 🐳
4. 细 🐛 胞扩 🦋 增 🪴
传代培 🐬 养 💮
使 ☘ 用生物反应器进行 🐵 大规模扩 🐱 增
5. 细 🌷 胞表 🌺 征 🦉
流式细胞术细胞(表面标记物 🦁 分析)
PCR(基因表达 🐈 分 🍀 析 🌲 )
功能分析分(化 🦈 潜力、免 🌹 疫原性 🕸 )
6. 细 🦢 胞冻存 🐋
冷 🐋 冻 DMSO 或 🦈 其他细胞保护剂
存储 🦅 在 🌿 液 🦆 氮中
7. 质量 🐳 控制
细胞数量和活力 🐅 测定
无菌性 🐘 检测
遗 🌻 传 🐺 稳定性分析 🦆
8. 释放 🐒 和 🕷 发运
符合 🦈 监 🐡 管要求的质量控制文件
适 🌿 当的包装和运输条件
附加 🐋 步骤 🦊 (如有需 🐼 要)
诱 🌷 导分化:将 🕷 干细胞诱导分化为特定细胞类型
基因编辑:使用 CRISPRCas9 或其他技术对干细胞进行基 🪴 因工 🌸 程
药物筛选:使用干细 🕸 胞进行药物候选 🦄 物的筛选和毒性 🌸 测试