重庆大鼠原代 🐒 干细胞价格（重庆大鼠原代干细胞价格多少 🐠 ）
- 作者: 刘梓豪
- 来源: 投稿
- 2025-02-16
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4、大鼠 🍀 脂肪干 🌷 细胞原代培养
大鼠脂 🌹 肪干细胞原 🦍 代培养
材料和 🐒 设 💮 备 🐕 ：
大鼠脂肪 🌳 组 🦋 织
磷酸缓 🦉 冲 🦟 盐溶 🐎 液 (PBS)
胶原酶溶 🐠 液（0.1%）
脂肪 🐎 细 🕸 胞分离 🌹 液
培养基 🐬 （如 🦄 DMEM + 10% FBS）
培养皿胰蛋白 🦍 酶 🌻
离心机步骤：
1. 脂 🐳 肪组织 🕷 采集 🌷 ：
从 🕊 大鼠腹部切取约 23 g 脂肪 🌸 组 🌵 织。
用 PBS 冲洗组 🐼 织 🌺 以去除血液和 🪴 杂质。
2. 脂肪 🐋 细胞分离：
将脂肪组 🕷 织 🦈 切成 🌳 小块。
在 🌻 37°C 孵 🐳 育 12 小时，使胶原酶消化脂肪细胞。
过滤消 🐝 化液以 🐡 除去细 🐵 胞外基质。
使用 🐱 脂肪细胞分离液 🌿 进行离心，收集脂肪细胞 🐳 。
3. 脂肪干 🦆 细胞 🐎 分离：
将脂肪细 🌿 胞悬浮在培 🐘 养基中并播种在培养皿中 🦆 。
孵育 34 天后 🐕 ，脂肪干 ☘ 细胞 🐞 将贴壁生长。
用胰 🦁 蛋白酶消化贴壁细胞并重新 🐴 播种以去除未分化 🌹 的脂肪细胞。
4. 培养和扩增 🐘 ：
每 34 天更 🐦 换培 🌷 养 🐧 基。
当细胞达到 8090% 汇 🕸 合度时，用胰蛋白 🐎 酶消化 🦈 并传代。
重复传代以扩增 🐵 脂肪干细胞。
验证：流式细胞术 🦁 分析：检测 CD34、CD45、CD73 和 CD90 等脂肪干细胞标 🌾 志物。
多向分化 🐝 ：诱导脂肪干细胞分化为成骨细胞成、软骨细胞和成脂 🐛 肪细胞。
注意事 🐞 项：
使用 🦍 无菌技 🦊 术进行操作以 🍀 防止污染。
保留离心和胰蛋白酶消化的 🐕 上清液，以回收未分化的脂质。
通过分化试验和 🌷 免疫表型确认脂肪干细 🌵 胞的特性。
定 🌸 期监测培养物以了解 🐼 细胞生长和 🐧 分化。
