造血干细胞计数原理（造血干细胞计数的国际标准方案）
- 作者: 郭言溪
- 来源: 投稿
- 2024-12-13
1、造血干细胞计数原理
造血干细胞（HSC）计数原理
1. 同位素稀释法：
向患者体内注射已知数量的放射性同位素标记的HSC。
等待一定时间后，采集骨髓或外周血样品。
测量标记的HSC的比例，从而计算原始HSC数量。
2. 流式细胞术：
采集骨髓或外周血样品。
使用荧光标记的抗体对HSC表面标志物进行染色。
使用流式细胞术对标记的HSC进行分类和计数。
3. 聚合酶链反应（PCR）：
采集骨髓或外周血样品。
提取DNA并使用PCR扩增HSC特异性基因。
通过比较扩增产物的量，来估计HSC数量。
4. 巢形成细胞（CFC）测定：
采集骨髓或外周血样品。
将细胞悬浮液接种到培养基中。
孵育一定时间后，形成的CFC被计数。每个CFC代表一个具有造血潜能的HSC。
HSC计数方法的选择：
具体使用的HSC计数方法取决于研究目的、样品可用性和技术可用性。
优点和缺点：
同位素稀释法：准确性高，但涉及放射性标记，可能存在伦理问题。
流式细胞术：快速、相对容易，但可能存在抗体特异性和交叉反应的问题。
PCR：灵敏，但依赖于引物特异性，并且可能受到样品质量的影响。
CFC测定：模拟造血过程，但比较耗时，并且可能存在细胞培养可变性。
2、造血干细胞计数的国际标准方案
造血干细胞计数的国际标准方案
目的：标准化造血干细胞 (HSC) 计数方法，以确保结果一致和可靠。
为研究和临床实践提供一个通用的参考框架。
方法：样本制备：
从骨髓或外周血中采集样本。
密度梯度离心法分离单核细胞。
用荧光标记抗体标记细胞。
流式细胞术分析：
使用流式细胞仪分析标记的细胞。
识别并计数表达造血干细胞特异性标记的细胞亚群。
造血干细胞标记：
CD34+
CD38
CD45+
Lin（缺乏谱系标记，如 CD3、CD14、CD19、CD20）
绝对 HSC 计数：
CD34+CD38CD45+Lin 细胞的总数。
用体积换算成每 mL 血液或每克骨髓中的数量。
相对 HSC 比例：
CD34+CD38CD45+Lin 细胞在所有 CD34+ 细胞中所占的比例。
报告结果：
报告绝对 HSC 计数和相对 HSC 比例。
阐明所使用的标记和方法。
质量控制：
定期校准流式细胞仪。
使用对照样品验证标记抗体的特异性。
通过重复分析进行内部质量控制。
注意事项：
不同标记方案可能会产生不同的结果。
样本制备和分析过程中的差异可能会影响计数。
应考虑患者的年龄、健康状况和其他因素的影响。
3、造血干细胞计数是什么意思
造血干细胞计数
造血干细胞计数用于测量血液中造血干细胞（HSC）的数量。HSC是具有产生所有类型血细胞（包括红细胞、白细胞和血小板）能力的多能干细胞。
计数方法造血干细胞计数通常通过流式细胞术进行，这是一种利用荧光标记抗体和细胞分选仪对细胞进行分析的技术。血液样品中会加入抗体，然后通过流式细胞仪进行分析，以识别并计数带有特定标记的HSC。
计数结果造血干细胞计数结果通常以每毫升血液中HSC的细胞数表示。正常范围因年龄和性别而异，但一般在 20250 个 HSC/mL 之间。
临床意义造血干细胞计数可以帮助评估以下情况：
骨髓疾病：低计数可能表明骨髓衰竭或其他骨髓疾病。
癌症：某些癌症（如白血病）会影响HSC的产生和数量。
移植：计数可用于评估供体和受体的 HSC 匹配程度，以确定造血干细胞移植的可行性。
监测治疗：计数可用于监测骨髓衰竭或癌症治疗的疗效。
重要注意事项
造血干细胞计数会受到多种因素影响，包括年龄、性别、种族、健康状况和药物治疗。
解释计数结果时，必须考虑这些因素以及病史和体格检查。
单次计数可能不足以诊断疾病，通常需要多次计数来确定趋势或评估治疗效果。
4、造血干细胞计数多少为正常
个/μL
