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造血干细胞计数原理(造血干细胞计数的国际标准方案)

  • 作者: 郭言溪
  • 来源: 投稿
  • 2024-12-13


1、造血干细胞计数原理

造血干细胞(HSC)计数原理

1. 同位素稀释法:

向患者体内注射已知数量的放射性同位素标记的HSC。

等待一定时间后,采集骨髓或外周血样品。

测量标记的HSC的比例,从而计算原始HSC数量。

2. 流式细胞术:

采集骨髓或外周血样品。

使用荧光标记的抗体对HSC表面标志物进行染色。

使用流式细胞术对标记的HSC进行分类和计数。

3. 聚合酶链反应(PCR):

采集骨髓或外周血样品。

提取DNA并使用PCR扩增HSC特异性基因。

通过比较扩增产物的量,来估计HSC数量。

4. 巢形成细胞(CFC)测定:

采集骨髓或外周血样品。

将细胞悬浮液接种到培养基中。

孵育一定时间后,形成的CFC被计数。每个CFC代表一个具有造血潜能的HSC。

HSC计数方法的选择:

具体使用的HSC计数方法取决于研究目的、样品可用性和技术可用性。

优点和缺点:

同位素稀释法:准确性高,但涉及放射性标记,可能存在伦理问题。

流式细胞术:快速、相对容易,但可能存在抗体特异性和交叉反应的问题。

PCR:灵敏,但依赖于引物特异性,并且可能受到样品质量的影响。

CFC测定:模拟造血过程,但比较耗时,并且可能存在细胞培养可变性。

2、造血干细胞计数的国际标准方案

造血干细胞计数的国际标准方案

目的:

标准化造血干细胞 (HSC) 计数方法,以确保结果一致和可靠。

为研究和临床实践提供一个通用的参考框架。

方法:

样本制备:

从骨髓或外周血中采集样本。

密度梯度离心法分离单核细胞。

用荧光标记抗体标记细胞。

流式细胞术分析:

使用流式细胞仪分析标记的细胞。

识别并计数表达造血干细胞特异性标记的细胞亚群。

造血干细胞标记:

CD34+

CD38

CD45+

Lin(缺乏谱系标记,如 CD3、CD14、CD19、CD20)

绝对 HSC 计数:

CD34+CD38CD45+Lin 细胞的总数。

用体积换算成每 mL 血液或每克骨髓中的数量。

相对 HSC 比例:

CD34+CD38CD45+Lin 细胞在所有 CD34+ 细胞中所占的比例。

报告结果:

报告绝对 HSC 计数和相对 HSC 比例。

阐明所使用的标记和方法。

质量控制:

定期校准流式细胞仪。

使用对照样品验证标记抗体的特异性。

通过重复分析进行内部质量控制。

注意事项:

不同标记方案可能会产生不同的结果。

样本制备和分析过程中的差异可能会影响计数。

应考虑患者的年龄、健康状况和其他因素的影响。

3、造血干细胞计数是什么意思

造血干细胞计数

造血干细胞计数用于测量血液中造血干细胞(HSC)的数量。HSC是具有产生所有类型血细胞(包括红细胞、白细胞和血小板)能力的多能干细胞。

计数方法

造血干细胞计数通常通过流式细胞术进行,这是一种利用荧光标记抗体和细胞分选仪对细胞进行分析的技术。血液样品中会加入抗体,然后通过流式细胞仪进行分析,以识别并计数带有特定标记的HSC。

计数结果

造血干细胞计数结果通常以每毫升血液中HSC的细胞数表示。正常范围因年龄和性别而异,但一般在 20250 个 HSC/mL 之间。

临床意义

造血干细胞计数可以帮助评估以下情况:

骨髓疾病:低计数可能表明骨髓衰竭或其他骨髓疾病。

癌症:某些癌症(如白血病)会影响HSC的产生和数量。

移植:计数可用于评估供体和受体的 HSC 匹配程度,以确定造血干细胞移植的可行性。

监测治疗:计数可用于监测骨髓衰竭或癌症治疗的疗效。

重要注意事项

造血干细胞计数会受到多种因素影响,包括年龄、性别、种族、健康状况和药物治疗。

解释计数结果时,必须考虑这些因素以及病史和体格检查。

单次计数可能不足以诊断疾病,通常需要多次计数来确定趋势或评估治疗效果。

4、造血干细胞计数多少为正常

个/μL

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