造血干细胞计数原理(造血干细胞计数的国际标准方案)
- 作者: 郭言溪
- 来源: 投稿
- 2024-12-13
1、造血干细胞计数原理
造血干细胞(HSC)计数原理
1. 同位素稀释法:
向患者体内注射已知数量的放射性同位素标记的HSC。
等待一定时间后,采集骨髓或外周血样品。
测量标记的HSC的比例,从而计算原始HSC数量。
2. 流式细胞术:
采集骨髓或外周血样品。
使用荧光标记的抗体对HSC表面标志物进行染色。
使用流式细胞术对标记的HSC进行分类和计数。
3. 聚合酶链反应(PCR):
采集骨髓或外周血样品。
提取DNA并使用PCR扩增HSC特异性基因。
通过比较扩增产物的量,来估计HSC数量。
4. 巢形成细胞(CFC)测定:
采集骨髓或外周血样品。
将细胞悬浮液接种到培养基中。
孵育一定时间后,形成的CFC被计数。每个CFC代表一个具有造血潜能的HSC。
HSC计数方法的选择:
具体使用的HSC计数方法取决于研究目的、样品可用性和技术可用性。
优点和缺点:
同位素稀释法:准确性高,但涉及放射性标记,可能存在伦理问题。
流式细胞术:快速、相对容易,但可能存在抗体特异性和交叉反应的问题。
PCR:灵敏,但依赖于引物特异性,并且可能受到样品质量的影响。
CFC测定:模拟造血过程,但比较耗时,并且可能存在细胞培养可变性。
2、造血干细胞计数的国际标准方案
造血干细胞计数的国际标准方案
目的:标准化造血干细胞 (HSC) 计数方法,以确保结果一致和可靠。
为研究和临床实践提供一个通用的参考框架。
方法:样本制备:
从骨髓或外周血中采集样本。
密度梯度离心法分离单核细胞。
用荧光标记抗体标记细胞。
流式细胞术分析:
使用流式细胞仪分析标记的细胞。
识别并计数表达造血干细胞特异性标记的细胞亚群。
造血干细胞标记:
CD34+
CD38
CD45+
Lin(缺乏谱系标记,如 CD3、CD14、CD19、CD20)
绝对 HSC 计数:
CD34+CD38CD45+Lin 细胞的总数。
用体积换算成每 mL 血液或每克骨髓中的数量。
相对 HSC 比例:
CD34+CD38CD45+Lin 细胞在所有 CD34+ 细胞中所占的比例。
报告结果:
报告绝对 HSC 计数和相对 HSC 比例。
阐明所使用的标记和方法。
质量控制:
定期校准流式细胞仪。
使用对照样品验证标记抗体的特异性。
通过重复分析进行内部质量控制。
注意事项:
不同标记方案可能会产生不同的结果。
样本制备和分析过程中的差异可能会影响计数。
应考虑患者的年龄、健康状况和其他因素的影响。
.jpg)
3、造血干细胞计数是什么意思
造血干细胞计数
造血干细胞计数用于测量血液中造血干细胞(HSC)的数量。HSC是具有产生所有类型血细胞(包括红细胞、白细胞和血小板)能力的多能干细胞。
计数方法造血干细胞计数通常通过流式细胞术进行,这是一种利用荧光标记抗体和细胞分选仪对细胞进行分析的技术。血液样品中会加入抗体,然后通过流式细胞仪进行分析,以识别并计数带有特定标记的HSC。
计数结果造血干细胞计数结果通常以每毫升血液中HSC的细胞数表示。正常范围因年龄和性别而异,但一般在 20250 个 HSC/mL 之间。
临床意义造血干细胞计数可以帮助评估以下情况:
骨髓疾病:低计数可能表明骨髓衰竭或其他骨髓疾病。
癌症:某些癌症(如白血病)会影响HSC的产生和数量。
移植:计数可用于评估供体和受体的 HSC 匹配程度,以确定造血干细胞移植的可行性。
监测治疗:计数可用于监测骨髓衰竭或癌症治疗的疗效。
重要注意事项
造血干细胞计数会受到多种因素影响,包括年龄、性别、种族、健康状况和药物治疗。
解释计数结果时,必须考虑这些因素以及病史和体格检查。
单次计数可能不足以诊断疾病,通常需要多次计数来确定趋势或评估治疗效果。
4、造血干细胞计数多少为正常
个/μL