cd90牙周膜干细胞（牙周 🦁 膜干细胞原 🐧 代提取）
- 作者: 马珂芋
- 来源: 投稿
- 2025-02-25
1、cd90牙周膜干 🦟 细胞
CD90 牙周 🍁 膜干 🐶 细 🦈 胞
定义：CD90 牙周膜干细胞是从牙周组织 🌵 中分离出的多能干细胞。它们以其表面标记 CD90 而。得 🌷 名
来源：牙周 🦟 膜干细胞通常从牙 🐛 周韧带牙、龈和牙槽嵴等 🌴 牙周组织中分离出来。
特性：多能性：CD90 牙 🐶 周膜干细胞具有分化为成骨细胞成、纤、维细胞脂肪细胞和软 🍀 骨细胞等多种细胞 🐯 类型的潜力。
自我更新：它们能够分裂并产生具有相同多能 💮 特性的子代细胞，从而保持干细胞库。
免疫调节 🦟 ：CD90 牙周膜干细胞显示出免疫调 💮 节特性 ☘ ，有助于抑制炎症和促进组织再生。
血管生成：它们可以促进血管生成，为组织 🐈 愈合提 🌻 供必要的血液供应。
应用：CD90 牙周膜干 🕷 细胞在牙科和再生医学中显示出广泛的应用潜力，包括 🕷 ：
牙周组织再 🌷 生：修复牙周病引起的组织破 🐶 坏，如牙龈萎缩和骨缺损。
骨再生：促 🐅 进颌 🍁 骨缺损和骨折的骨 🌴 愈合。
软组织修复：恢复因创伤 🐞 或 🌹 疾病而受损的牙龈和粘膜。
血管再生：改善血液 🦢 供 🐯 应，促进组织再生 💐 。
免疫调节：减轻炎症和促进受损组织的愈 🦄 合。
研究 🐘 方向 🍀 ：
CD90 牙周膜干细胞的研究仍然是活跃的领域，重 🍁 点是：
优化培养 🦊 和 🐈 分化 💮 条件。
了 🌼 解它 🌵 们在组织再生中的机制。
开发基于干细胞的治疗方法以改善牙科和全身 ☘ 性疾病。
2、牙周膜干细胞原代提 🌵 取 🐺
牙周膜干细胞原 ☘ 代提取
材料：已 🕷 拔出的人类牙周膜组织
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM)
含10%胎牛血 🐺 清（FBS）的DMEM（培）养基
抗生素 🌸 （青霉素、链霉素和真菌 🌷 素）
无血清 🐟 培养基（含10 ng/mL表皮生长因子（EGF））
0.25%胰 🌻 蛋白 🐳 酶 🦁 /0.02%EDTA
血红细胞 🐳 裂解缓冲液
70%乙 🐳 醇
步骤：1. 组织 🐼 收 🐺 集和处 🐝 理
将新鲜 🌹 拔出的 🐦 牙周膜组织仔细 🌺 切碎。
用含有抗生素的培养基 🐱 洗涤组织碎片。
2. 去除 🐳 血红细胞 🕷
将组织碎片转移到血红细胞 🌷 裂解缓冲液中，孵育15分，钟以 🌼 除去血红细胞。
用培养基洗涤 🌲 组织碎 🐡 片 🐺 。
3. 酶促 ☘ 消化 🐠
将组 🌸 织碎片转移到0.25%胰 🍀 蛋白酶/0.02%EDTA溶液中，在37°C下孵育30分，钟以消化细胞外基质。
4. 单细 🦆 胞悬液 🦆
用 🐝 培养基终止酶 🐝 促 🐬 消化。
过滤单细胞悬 🌵 液以去除未消化的组织碎 💮 片。
用离心将细 🐶 胞沉 🐎 淀下来 🦄 。
5. 贴 🌷 壁培养
将细胞重悬浮在 🌳 无血清培养 🐞 基中 🌴 （含EGF）。
将细 🐦 胞接种到培养 🌾 皿 🐒 中。
6. 培 🐴 养 🕷
将细胞培养在37°C、5% CO2的湿润 💐 环境中。
每 🦆 23天更换培养基 🌸 。
7. 干细 🐦 胞鉴定
通过流式细胞术或免疫组化分析来表征干细胞标志物，如STRO1和 🐛 CD146。
进行多向分化 ☘ 实 🦄 验来评估干 🐦 细胞的分化潜能。
提示：使用无菌技术进行整个过 💐 程。
使 🐶 用新鲜组织以获 🦆 得最佳 🐡 结果。
优化胰蛋白酶/EDTA处理时间，以最大化细胞存活率和干 🦅 细胞丰度。
使用无血 🐈 清培养基促进干细胞生长和自我更新。
仔细监测细胞培养 🌷 ，观察 🦉 细胞形态和生长状 🪴 况。
3、牙周 🐋 膜干细胞提取方 🕸 法
牙周膜干细胞提 🐘 取方法
牙 🦄 周膜干细胞 (PDLCs) 是从牙周膜中提取的多能干细胞。它们具有再生牙周组织和治疗牙周疾病的潜力的提取。PDLCs 过程通常 🦋 包括以下步骤：
1. 组 🐟 织采 🐡 集 🐴
从健康的 🦅 牙 🐒 周组织中取出牙 🐞 周膜样本。
样本通常来自 🐒 拔除的 🌹 牙齿或牙周手 🐝 术。
2. 组织 🐵 酶 🕸 解 ☘
使用胶原酶和透明质酸酶等酶将组织分解 🐠 成单细胞悬浮液。
这 🐝 有助于释放 PDLCs 并 💮 去除细胞外基质。
3. 细 🦍 胞 🐈 分离
根据 🌲 对 PDLCs 特异性标 🌺 志物的亲和力，使用流式细胞仪或磁珠分选 🐺 法分离 PDLCs。
PDLCs 通常表 🦅 达 STRO1、CD146 和 CD105 等 🌷 标志物 🐠 。
4. 细胞扩增 🐘
分离后的 PDLCs 在富含生长 🐦 因 🐋 子的培养基中进行扩增。
培养条件通常优化为支 🌼 持 🌿 PDLCs 的增殖和维持 🦉 其干细胞特性。
5. 鉴 🐕 定 🐯 和 🪴 表征
通过免疫荧光、流式细胞术 🐟 和 RTPCR 分析对扩增的细胞进行鉴定和表 🐺 征 💮 。
PDLCs 通常表现出干细胞标 🌸 志 🕷 物，如 🐟 STRO1、Oct4 和 Sox2 的表，达、并具有成骨成牙和成软骨的多向分化能力。
注意事项PDLCs 的提取效率可能因组织来 🍀 源 🌳 、酶解条件和细胞分离方法而 🌳 异。
从不 🐛 同患者中提取的 PDLCs 可能存在异质性，这可能会影响其治疗潜力。
PDLCs 的临床应用仍在研 🌿 究中，需要进一步的研究来确定其 🦅 在牙周 🐼 组织再生和牙周疾病治疗中的安全性、有效性和长期效果。
4、牙周膜干细 🌷 胞原代培 🌷 养
牙周膜干细胞原 🦊 代培养
牙周膜干细胞 (PDLSCs) 是一种多能干细胞，存在于牙周膜中。它们具有自 🌴 我更新和分化为成骨 🪴 细胞成牙、本，质细胞。和。成纤维细胞的能力使其成为牙周组织修复和再生很有前途的细胞来源原代培养是将牙周膜干细胞分离并培养在体外以研究其特性和用途的技术
材料拔 🦉 出的牙齿
酶解缓冲液（含有胶 🦆 原酶和 🐶 透明质酸 🐛 酶）
培 🍁 养基（含有血清和生长因子 🐋 ）
培养 🦢 瓶或培养皿
移液器细胞 🌼 计 🐼 数 🌹 器
显微镜方法
1. 分 🦈 离牙周膜 🌷 干细 🌸 胞
从拔出的牙齿 🌹 中分离牙周膜组织 🐧 。
将组织切成 🐱 小 🦋 块。
在含有酶 🦟 解缓冲液的 💮 培养皿中过夜酶解。
2. 过滤 🌼 和离 🐞 心
将酶解后的悬 🐈 液 💐 过滤以去 🐼 除细胞碎片。
离 💐 心收集细胞 🐬 。
3. 细胞计数和培 🦉 养
计算 🌴 收集 🕸 到 🐕 的细胞数量。
将细胞悬液接种到培养瓶或培养皿 🌵 中培养，基含有血清 🌾 和 🐋 生长因子。
在 37°C 和 5% CO2 下培养细 🐯 胞。
4. 培养基更 🦉 换 🌻
每 23 天更换培养基以提供新鲜 🌿 的营养和生长因子。
5. 观察 🦆 细 🐵 胞生 💮 长
使 🕊 用显微镜监测细胞生长和 🦟 形态。
PDLSCs 通常表现为 🐈 长梭状或星状细胞。
6. 传 🌷 代 🐛
当细胞达 🐅 到 8090% 的汇合 🕊 度时，可以进行传代。
胰 🌻 蛋白酶消 🐧 化细胞并重新接种到新的培养瓶或培养皿中。
注意事项使用 🐴 无菌技术以防止 🌵 污染。
使用高品质的培养基和生长因子以促进细 🦢 胞 🌿 生长。
定 🦉 期 🌳 监测细胞生长并根 🐎 据需要进行传代。
应用原代培养的牙周膜干细胞可用于各种 🐠 研 🌾 究和临床 🐧 应用，包括：
研究牙 🐱 周疾病的病理生 🦢 理 🌼 学
开发牙周组织修复和再生 🌵 疗法 🌵
组织工 🐈 程 🦄 和生 🌾 物医学工程应用
