小鼠脂 🌺 肪干细胞 🦢 诱导（诱导多能干细胞可以转变为脂肪吗）
- 作者: 马珺朵
- 来源: 投稿
- 2025-02-16
1、小鼠 🪴 脂肪干细 🐳 胞诱导
小鼠脂肪 🕷 干细胞诱导
定义：小鼠脂肪干细胞诱导是在体外条件下将小鼠脂肪干细胞分化为其他类 🦋 型细胞的过程，如神 🦉 经元、心肌细胞或胰岛细胞。
过程：1. 脂肪组织 🌼 采集：从小鼠腹部或其他脂肪 🐟 组织部位采集 🌸 脂肪组织。
2. 组 💮 织 🌳 消化：将脂肪组织酶促消化成单个细胞 🐱 。
3. 干细胞分离分离：出 🐠 脂肪干细胞，通，常使用表面标志物如 CD44 和 CD90。
4. 诱导培养：将 🌴 脂肪干细胞置于特定的培养基中，含，有特定的生长因子和信号分子以 🦍 引导细胞向目标细胞类型分化。
5. 细胞鉴定：使用免疫组化 ☘ 、流式细胞术或功能分析来鉴定诱导后的细胞类型。
诱导方 🦢 法：
生长因子诱导：使用表皮 🦅 生长因子 (EGF)、成纤维细胞生长因子 (FGF) 和神经营养因子 (NGF) 等生长因子。
转录因子诱导：使 🦁 用转录因子，如 Oct4、Sox2 和 Klf4，将 🐱 细胞 🦟 重新编程为诱导多能干细胞 (iPSC)。
表观遗传 🌵 调控：通 🌴 过组蛋白修饰 🐯 或 DNA 甲基化等表观遗传调控诱导细胞分化。
应用：再生 🌹 医学生：成用于修复损 🐝 伤或治疗疾病的细胞。
药物 🐠 筛选：用于测试候 🌺 选药物对特定 🦈 细胞类型的影响。
发育生 🦄 物学：研究细胞 💮 分化的机制。
组织工程：生成用于构建组织或器官的细胞 🐶 支架。
优点：从易于获取的来源获得干细胞 🕷 。
高分化潜能，可分化 🦁 为多种细胞 🐦 类型。
相对容易 🌹 的诱导过 🐅 程。
缺点：可能产生异质性细胞群 🐝 ，包括未完全分化的细胞。
有 🐘 形成瘤的风险，特别是使用 🌷 转录因子诱 🐱 导时。
可能需要进一步的功能成熟以获 🐈 得完全 🦁 分化 🌾 的细胞。
2、诱 🐯 导多能干细胞可以转变为 🌷 脂肪吗
是的，诱导多能干细胞 (iPSC) 可以转变为脂 🦁 肪细 💮 胞。
iPSC 是一种 🐳 可以通过重新 🐶 编程成体细胞而创建的多功能细胞。它们与胚胎干细胞类似，具，有。分化为各种细胞类型 🐧 的潜力包括脂肪细胞
诱导 iPSC 转化为脂肪细胞的过程称为脂肪细胞分化。它 iPSC 涉。及使用特定因子和培养 🐱 条件来诱导激活形成脂肪细胞所需的基因
脂肪细胞分 🦈 化后的 iPSC 称为皮 🐕 下脂肪 🌲 细胞样细胞。它们表现出脂肪细胞的特征，例如：
储 🌲 存 🌵 脂 🐛 质
表 🪴 达脂肪 🌴 细胞特异 🐘 性标记
产生 🦈 脂肪细胞因子
iPSC 衍生的脂肪细胞有望用于研究肥胖、糖尿病和脂肪代谢失调等与脂肪相关疾病的潜在治疗方法。它们还可以用于再生医学，例。如重建受损或丢 🍁 失的脂肪组织
3、小鼠脂肪间充质干细 🐺 胞提 🦆 取
小 🐺 鼠脂肪间充质干细胞提取
材料：小鼠（812 周 🦆 龄）
无 🦆 菌器械（镊子、剪、刀、手、术刀针筒注射 🦋 器）
PBS（磷 🕸 酸盐缓冲 🕸 液）
脂肪 🌴 组织 🐘 酶解液（0.2% 胶原酶 IV）
过滤网 🦅 （70 μm 和 🕷 100 μm）
培 🐶 养 🐕 基（含 10% FBS）
离心机步骤：
1. 准 🦢 备小鼠：麻 🐋 醉小鼠并保持无菌 🌴 条件。
2. 切取脂肪组织：沿小腹部位切 🕊 开皮 🐎 肤，暴露腹膜腔切。除，一小部。分腹股沟脂肪组织并将 🐵 其放入培养皿中
3. 酶解脂肪组织：向 🐶 脂肪组织 🌻 中加入酶解液，使其覆盖组织。在 37°C 下孵育 30 分，钟每分钟 10 搅。拌 🕸 一次
4. 过滤细胞悬 🦟 液：用过滤 70 μm 网过滤细胞悬液，去除大 🐼 块组织碎片。随后用过滤 🐺 网过滤悬液 100 μm 收，集细胞。
5. 离心分离：将细胞悬液以离心分 300 x g 钟 🐶 5 弃。去上清液，收。集细胞 🐈 沉淀
6. 重 💐 悬：用培养基重悬细胞沉淀，洗涤细胞。再，次。离心弃 🐱 去上清液
7. 培养：将细胞重悬在培 🍀 养基中，并接种到培养皿中在培养。箱中培养细胞 37°C、5% CO2 。
注 🐎 意 🐠 事项：
确 🦄 保无菌操 💮 作，以防止 🐱 污染。
使用新鲜的小鼠脂肪 🦢 组织，以获得最佳的干细胞产量。
酶解 🌾 时间根 🦈 据脂肪组织的量而异。如果 🌹 组织量较大，可。能需要延长酶解时间
过滤细胞 🌸 悬液时 💐 ，使用无菌 🐛 过滤器。
培 🐈 养细胞时 🦊 ，要，注意观察细胞生长情况并在细胞贴壁后更换培养基。
4、小鼠脂肪干细 🐅 胞怎么提取
小鼠脂 🌸 肪干 🕷 细胞提取 🦉 步骤：
材料：小鼠
无菌手 🐳 术器械
无菌培 🪴 养皿
无血清 ☘ 培养基
胶原酶 🦅 溶液
胰蛋白酶 🐺 溶液
离心机步骤：
1. 麻醉小 🐕 鼠：使用异氟醚或其他麻醉剂麻醉小鼠。
2. 消毒手术 🐺 部位：用碘伏消毒 🌹 小鼠的腹部区域。
3. 打开切口：沿腹部中线切开皮肤和皮下组 🌻 织，暴露脂肪组织 🌸 。
4. 切 🐛 除脂肪 🦅 组织：小心地切除一团脂肪组织（约0.51克）。
5. 洗涤脂肪组织 🦉 ：用无菌生理盐水多次洗 🌵 涤脂肪组织以去除 🦁 血液和其他杂质。
6. 消化脂肪组织：将脂肪组织放入含有胶原酶溶液（0.2%）的培养皿中并孵育 🐯 60 分钟，37°C。
7. 终止消化：向培养皿中加入等体 ☘ 积的无血 🐱 清培养基以终止胶原酶活性。
8. 离心：将培养皿离心 🐶 10 分钟，2000 x g。
9. 分离上清液：小心地吸取上清液，其中含有脂肪干细 🦁 胞。
10. 洗涤脂肪干细胞 🐯 ：用无菌培养基洗涤 🦁 脂肪干细胞，并再次离心。
11. 培养脂肪干细胞：将脂肪干细胞悬浮在含生长因子的无血清培养基中 🐕 ，并置于培 🐡 养箱中 🌳 ，37°C、5% CO2。
提示：为了获得更好的产量，可以在胰蛋白 🕊 酶溶 🌲 液中进一步 🐝 消化脂肪组织 1015 分钟。
悬浮脂肪干细胞时，应小 🐳 心避免产 🪴 生气 🦋 泡。
为了选择脂肪干细胞，可以在培养期 🌵 间使用流式细胞术或分化诱导等技术。
