小鼠胚胎干细胞系常用系（小鼠胚胎干细胞最早于1981年获得）
- 作者: 郭北棠
- 来源: 投稿
- 2025-01-26
1、小鼠胚胎干细胞系常用系
ESD3 细胞系
2、小鼠胚胎干细胞最早于1981年获得
错误小鼠胚胎干细胞最早于1981年分离，而不是获得。分离是指从胚胎中分离出发育中的细胞。
3、小鼠胚胎干细胞可以来自囊胚中的
内细胞团4、小鼠胚胎干细胞系的建立
小鼠胚胎干细胞系的建立
胚胎干细胞 (ESC) 是从内部细胞团 (ICM) 中分离的多能细胞，具有无限自我更新和分化为所有三个胚层的能力。建立小鼠 ESC 系是一项重要的技术，用于研究发育生物学、干细胞生物学和再生医学。
程序：1. 取出胚胎
从雌性小鼠中取出受孕约 3.5 天的胚胎。
将胚胎转移到培养皿中，用 M2 培养基冲洗。
2. 分离内部细胞团 (ICM)
使用解剖针轻轻去除滋养层，露出 ICM。
将 ICM 转移到新的培养皿中。
3. 种植在饲养层上
将 ICM 种植在一层灭活的小鼠成纤维细胞（饲养层）上。
使用小鼠胚胎干细胞培养基（ESC 培养基）培养细胞。
4. 培养和筛选
培养细胞 57 天，直至形成细胞集落。
筛选形成圆形、紧密集落并表现出 ESC 特征的集落。
5. 扩增和冷冻保存
将筛选后的集落传代到新的饲养层上。
随着集落的生长，将其传代到更大的培养皿中。
当细胞达到足够的数量时，将其冷冻保存用于长期储存。
培养基和成分：
ESC 培养基通常含有：
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM)
15% 胎牛血清 (FBS)
白介素2 (IL2)
非必需氨基酸
谷氨酰胺
2巯基乙醇
验证和特征：
建立的 ESC 系应通过染色质核型分析、免疫表型和分化潜能来验证。
ESC 应表现出以下特征：
无限制的增殖能力
保持正常的核型
表达 ESC 特异性标记，如 Oct4、Sox2 和 Nanog
能够分化为外胚层、中胚层和内胚层
应用：研究发育生物学和干细胞生物学
再生医学和组织工程
药物筛选和毒性测试
疾病建模
