干细胞培养过程演示(干细胞培养过程演示视频)
- 作者: 李芸汐
- 来源: 投稿
- 2024-12-27
1、干细胞培养过程演示
干细胞培养过程演示
材料:无血清培养基
生长因子
抗生素试管
培养板
移液枪
细胞刮刀
显微镜步骤:
1. 准备培养基:
将无血清培养基与生长因子和抗生素混合。
2. 贴壁细胞:
将贴壁细胞悬液接种到培养板或培养瓶中。
加入足够的培养基淹没细胞。
将培养物置于37°C、5% CO2的培养箱中。
3. 未贴壁细胞:
将未贴壁细胞悬液接种到含有生长因子和抗生素的试管中。
将培养物置于37°C、5% CO2的培养箱中。
4. 培养:
定期(23天)更换培养基。
观察细胞生长情况。
5. 分离:
贴壁细胞:
用细胞刮刀轻轻刮除细胞。
将细胞悬液转移到离心管中并离心。
去除上清液,保留细胞沉淀。
未贴壁细胞:
离心培养物。
去除上清液,保留细胞沉淀。
6. 传代:
将分离的细胞接种到新鲜的培养基中。
重复第25步。
7. 观察:
定期在显微镜下观察细胞生长情况。
检查细胞形态、增殖率和分化能力。
提示:使用无菌技术,以防止污染。
优化培养条件(温度、CO2浓度、营养成分)。
根据细胞类型调整培养基成分。
定期监测细胞健康状况,以确保培养物的质量。
2、干细胞培养过程演示视频
干细胞培养过程演示视频
步骤 1:培养基准备
将干细胞培养基与生长因子和抗生素混合。
步骤 2:培养皿处理
用灭菌溶液处理培养皿,以去除任何污染物。
在培养皿底部涂布一层细胞黏附基质。
步骤 3:细胞接种
使用移液管小心地将干细胞悬液接种到培养皿中。
轻柔地摇晃培养皿,使细胞均匀分布。
步骤 4:培养
将培养皿置于细胞培养箱中,在 37°C 和 5% 二氧化碳的条件下培养。
定期检查细胞生长,并更换培养基以提供新鲜营养。
步骤 5:细胞传代
当细胞达到 7080% 的汇合度时,需要进行传代。
使用胰蛋白酶溶液消化细胞,将其从培养皿中分离。
加入新鲜培养基,将细胞悬液分成较小的部分,重新接种到新的培养皿中。
视频演示:
[干细胞培养过程演示视频链接]
注意:干细胞培养是一个需要严格无菌操作和技术的技术。
在进行干细胞培养之前,应接受适当的培训和监督。
遵循所有规程,以确保细胞健康和培养的成功。
.jpg)
3、干细胞培养需要多长时间
干细胞培养所需的时间取决于培养的特定干细胞类型、所需细胞数量和培养条件。
一般而言,培养所需时间为:
胚胎干细胞 (ESC): 37 天
诱导多能干细胞 (iPSC): 24 周
间充质干细胞 (MSC): 12 周
造血干细胞 (HSC): 35 周
影响培养时间的一些因素包括:
起始细胞数量:培养所需的起始细胞数量越多,所需时间更长。
培养条件:培养基中生长因子的浓度、培养皿类型和孵育温度都会影响培养时间。
亚培养频率:细胞需要定期亚培养,这会导致培养时间的增加。
培养时间还可以受以下因素影响:
干细胞类型:不同类型的干细胞生长的速度和方式不同。
所需细胞数量:大规模培养需要更长的时间。
培养目的:用于研究或治疗的细胞培养方式和时间要求可能不同。
因此,干细胞培养所需的确切时间因具体情况而异。
4、干细胞培养过程演示图片
第 1 步:收集细胞
[收集细胞]()
第 2 步:分离细胞
[分离细胞]()
第 3 步:培养细胞
[接种细胞]()
[培养细胞]()
第 4 步:冷冻保存细胞
[冷冻保存细胞]()
第 5 步:解冻细胞
[解冻细胞]()
第 6 步:培养细胞
[培养细胞]()