骨髓间质干细胞是什么（骨髓间充质干细胞培养基）
- 作者: 陈蓝伊
- 来源: 投稿
- 2024-12-29
1、骨髓间质干细胞是什么
骨髓间质干细胞 (MSCs) 是存在于骨髓基质中的多能干细胞。它们是一种特殊类型的干细胞，具有自我更新和分化为多种细胞类型的能力。
特点：自我更新：MSC 能够不断增殖并自我更新，保持其干细胞特性。
多能性：MSC 可以分化为多种细胞类型，包括成骨细胞（骨细胞）、成软骨细胞（软骨细胞）、成肌细胞（肌肉细胞）、成脂肪细胞（脂肪细胞）和神经细胞。
免疫调节：MSC 具有抑制免疫反应和促进组织修复的能力。
归巢：MSC 可以归巢到受损的组织部位并促进组织修复。
来源：MSC 主要存在于骨髓中，但它们也可以存在于其他组织中，如脂肪组织和脐带血。
应用：MSC 在再生医学中具有广泛的应用，包括：
骨骼修复：治疗骨质疏松症、骨折和骨缺损。
软骨修复：治疗骨关节炎和其他软骨损伤。
心肌修复：治疗心肌梗死和其他心脏疾病。
神经修复：治疗中风、脊髓损伤和其他神经系统疾病。
免疫调节：治疗自体免疫疾病和异体移植排斥反应。
MSC 作为一种有前途的干细胞，在未来医学的发展中具有重大潜力。
2、骨髓间充质干细胞培养基
骨髓间充质干细胞培养基
骨髓间充质干细胞（BMSCs）培养基是一种专用于培养 BMSCs 的优化培养基。它含有支持 BMSCs 生长和增殖所需的必需营养物质和生长因子。
成分BMSCs 培养基通常包含以下成分：
基础培养基：例如 Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) 或 Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640
胎牛血清 (FBS)：提供生长因子和其他营养物质
生长因子：例如成纤维细胞生长因子 (FGF) 或表皮生长因子 (EGF)，以刺激细胞增殖
抗生素：例如青霉素和链霉素，以防止细菌污染
其他添加剂：例如 L谷氨酰胺 (作为氮源) 和非必需氨基酸
选择培养基
选择 BMSCs 培养基时需要考虑以下因素：
细胞来源：不同的供体来源的 BMSCs 可能需要不同的培养基成分。
培养目的：根据细胞的预期应用，培养基的选择可能会有所不同。例如，用于治疗的细胞可能需要更严格的标准。
成本和可用性：培养基的成本和可用性是需要考虑的实际因素。
最佳实践为了优化 BMSCs 培养，遵循最佳实践至关重要，包括：
无菌技术：使用无菌技术操作细胞和培养基。
适当的细胞密度：保持最佳的细胞密度以促进细胞生长和增殖。
定期换液：定期更换培养基以去除废物和补充营养物质。
环境控制：在 37°C 和 5% CO2 的潮湿孵箱中培养细胞。
监测细胞生长：定期监测细胞生长和形态，以识别任何异常情况。
由信誉良好的供应商提供的商业 BMSCs 培养基可以为 BMSCs 培养提供可靠和优化的方法。
3、人骨髓间充质干细胞提取
人骨髓间充质干细胞提取
步骤：1. 骨髓采集
从骨盆或脊柱抽取骨髓。
使用穿刺针或骨髓活检针。
2. 密度梯度离心
将骨髓与密度介质混合。
离心使干细胞集中在特定密度层。
3. 单个核细胞（MNC）分离
去除密度梯度离心后上层含脂肪的层。
收集含 MNC 的中层。
4. 贴壁培养
将 MNC 种植在组织培养皿中，铺有培养基。
干细胞贴附在培养皿上生长。
5. 悬浮细胞去除
数天后，非干细胞会悬浮在培养基中。
通过更换培养基去除悬浮细胞。
6. 干细胞扩增
干细胞继续贴附和增殖。
定期更换培养基以促进生长。
7. 干细胞收集
当干细胞达到所需数量时，使用胰蛋白酶消化贴壁细胞。
通过离心收集干细胞。
其他注意事项：
整个过程在无菌条件下进行。
可使用流式细胞术对干细胞进行表型分析。
干细胞可冷冻保存以备将来使用。
优势：从患者自身采集，无排斥反应。
多能性高，可分化为各种细胞类型。
具有修复和再生组织的潜力。
应用：骨科疾病和损伤修复
软骨再生
神经再生
心血管疾病治疗
癌症治疗
4、骨髓间充质干细胞提取
骨髓间充质干细胞提取
1. 骨髓抽取
在局部麻醉下，通过腰椎穿刺或髂骨穿刺收集骨髓 aspirate。
2. 密度梯度离心
将骨髓 aspirate 与对比剂（如 FicollPaque）分层。
通过离心将间充质干细胞（MSCs）与造血干细胞分离。
3. 细胞贴附
将 MSCs 悬液接种在培养皿中。
MSCs 会贴附在培养皿表面，而造血干细胞则会浮游在培养基中。
4. 传代扩增
去除非贴附细胞后，收集 MSCs 并进行传代培养。
MSCs 在培养基中可以快速扩增，通常传代 46 次以获得足够的细胞数量。
5. 特征鉴定
对扩增的 MSCs 进行表面标记（如 CD90、CD73、CD105）和分化潜能（如成骨、软骨、脂肪）分析，以确认其身份。
其他方法除了密度梯度离心法外，还可以使用以下方法提取 MSCs：
磁分离：使用磁珠，选择性地结合并分离 MSCs。
流式细胞术分选：使用荧光标记抗体，通过流式细胞术分选出 MSCs。
免疫吸附：使用与 MSCs 特异性表面标记结合的抗体或配体进行吸附选择性。
应用骨髓间充质干细胞在再生医学领域有着广泛的应用，包括：
骨骼修复
软骨再生
神经再生
心肌修复
免疫调节
