家兔干细胞形态特征(家兔肝脏细胞玻片标本的制作方法)
- 作者: 杨庭岳
- 来源: 投稿
- 2024-12-11
1、家兔干细胞形态特征
家兔胚胎干细胞(rESCs)
形态:无规则的圆形或多边形细胞,直径约为 810 μm。
表面标记:表达 Oct4、Sox2、Nanog、Rex1、Utf1 等胚胎干细胞相关标记。
核仁:大且突出,通常位于细胞中心。
胞质:透明且高密度,含有丰富的线粒体和内质网。
生长:在小鼠胚胎成纤维细胞或其他支持细胞的培养基中形成紧密且低矮的克隆。
家兔成年干细胞(rASCs)
形态:纺锤形或多角形细胞,直径约为 1525 μm。
表面标记:表达一些胚胎干细胞相关标记,但也表达其他标记,如 CD45、CD29、CD44。
核仁:通常不太明显,位于细胞中。
胞质:较薄且含有许多空泡。
生长:在无血清培养基中形成分散且生长缓慢的克隆。
2、家兔肝脏细胞玻片标本的制作方法
家兔肝脏细胞玻片标本的制作方法
材料:健康家兔
10% 福尔马林溶液
70% 乙醇溶液
95% 乙醇溶液
100% 乙醇溶液
苏木精染液
伊红染液
二甲苯中性树脂
盖玻片显微镜玻片
解剖工具
步骤:1. 解剖取样:
麻醉家兔后,剖腹取出肝脏。
切取肝脏一小块组织,约 5 mm x 5 mm。
2. 固定:
将组织样本浸泡在 10% 福尔马林溶液中,室温下固定 24 小时。
3. 脱水:
将固定后的组织样品依次浸泡在不同浓度的乙醇溶液中,脱水。脱水步骤如下:
70% 乙醇,1 小时
95% 乙醇,1 小时
100% 乙醇,1 小时
100% 乙醇,1 小时
4. 透明化:
将组织样品浸泡在二甲苯中,室温下透明化 30 分钟。
5. 包埋:
将组织样品浸泡在中性树脂中,室温下包埋 12 小时。
6. 切片:
使用切片机将包埋好的组织样品切成 57 μm 厚的薄片。
7. 脱蜡:
将薄片依次浸泡在二甲苯和不同浓度的乙醇溶液中,脱蜡:
二甲苯,15 分钟
100% 乙醇,5 分钟
95% 乙醇,5 分钟
70% 乙醇,5 分钟
蒸馏水,5 分钟
8. 染色:
将薄片浸入苏木精染液中,室温下染色 5 分钟。
用水漂洗干净。
将薄片浸入伊红染液中,室温下染色 2 分钟。
用水漂洗干净。
9. 脱水:
将染色后的薄片依次浸泡在不同浓度的乙醇溶液中,脱水。脱水步骤如下:
70% 乙醇,5 分钟
95% 乙醇,5 分钟
100% 乙醇,5 分钟
100% 乙醇,5 分钟
10. 透明化:
将脱水后的薄片浸泡在二甲苯中,透明化 10 分钟。
11. 封片:
在显微镜玻片上滴一滴中性树脂。
将薄片小心地放在树脂上。
盖上盖玻片。
室温下干燥 24 小时,即可观察。
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3、家兔干细胞形态特征是什么
家兔干细胞的形态特征:
形态:圆形或椭圆形
细胞质体积小,核质比高
细胞膜光滑无绒毛
细胞内器少,主要为小型的线粒体和内质网
细胞核:大且圆形
核仁明显
染色质弥散,核纤细纤细
细胞质:体积小,富含游离核糖体
内含物少,可能出现一些小液泡或小空泡
表面标志:
表达干细胞相关表面标志,如 Oct4、Sox2、Klf4、cMyc
不表达分化细胞标记
其他特征:
增殖能力强
无明确的分化方向
可分化为多种细胞类型
4、家兔干细胞形态特征有哪些
形态特征:
体积:直径一般为 510 微米
形状:圆形或椭圆形
细胞质:丰富,呈浅蓝色
细胞核:位于细胞一侧,较大,呈圆形或椭圆形
核仁:明显,呈深蓝色
质膜:清晰可见
表面标志物:表达 Oct4、Sox2、Nanog 等干细胞特异性标志物
特殊结构:
内质网:发育良好,在细胞质中形成丝状结构
高尔基复合体:发育良好,位于细胞质的近核侧
线粒体:形态正常,大小均匀,分布在细胞质中
溶酶体:数量较少,分布在细胞质中
分泌小泡:数量较少,位于细胞质的近质膜侧