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人牙源性干细胞培养条件(人牙源性干细胞培养条件有哪些)

  • 作者: 郭苏洛
  • 来源: 投稿
  • 2024-12-11


1、人牙源性干细胞培养条件

人牙源性干细胞(hDPSCs)培养条件

培养基:

Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) 或 αMEM

补充 1020% 胎牛血清 (FBS)

补充 1% 青霉素链霉素溶液

培养环境:

37°C

5% CO2

潮湿环境

培养皿:

聚苯乙烯或聚丙烯培养皿,涂有多聚赖氨酸或明胶

传代:

当细胞达到 7090% 的汇合度时进行传代

使用 0.25% 胰蛋白酶/0.02% EDTA 溶液消化细胞

每 23 天传代一次

分化诱导:

骨组织分化:补充骨形态发生蛋白 (BMP2)、地塞米松和抗坏血酸

软骨组织分化:补充转化生长因子β (TGFβ)、地塞米松和抗坏血酸

成神经细胞分化:补充脑源性神经营养因子 (BDNF)、神经生长因子 (NGF) 和谷氨酸

注意事项:

使用无菌技术进行所有操作。

定期更换培养基以保持细胞健康。

定期观察细胞形态和生长状况,以检测污染或其他异常。

优化培养条件可能根据特定细胞株而异。

2、人牙源性干细胞培养条件有哪些

人牙源性干细胞培养条件

培养基:

αMEM 或 DMEM/F12 培养基

1015% 胎牛血清 (FBS)

2 mM L谷氨酰胺

100 U/mL 青霉素/链霉素

培养物要求:

37°C

5% CO2

饱和湿度

培养基补充剂:

生长因子:

表皮生长因子 (EGF)

成纤维细胞生长因子2 (FGF2)

血小板来源生长因子 (PDGF)

抗生素/真菌剂:

青霉素/链霉素

霉素

培养物类型的特定培养条件:

牙根膜干细胞 (PDLSCs):

培养基:αMEM 或 DMEM/F12 培养基,含 10% FBS

培养物补充剂:EGF (10 ng/mL)、PDGF (10 ng/mL)

牙髓干细胞 (DPSCs):

培养基:DMEM/F12 培养基,含 15% FBS

培养物补充剂:EGF (20 ng/mL)、FGF2 (10 ng/mL)

牙周韧带干细胞 (PLSCs):

培养基:αMEM 或 DMEM/F12 培养基,含 10% FBS

培养物补充剂:EGF (10 ng/mL)、PDGF (10 ng/mL)、成骨细胞分化因子1 (BMP1) (10 ng/mL)

其他培养条件:

培养物密度:

通常为 个细胞/cm2

培养物更换频率:

每 34 天更换一次培养基

传代频率:

当细胞达到 8090% 汇合度时传代

冷冻保存:

使用 DMSO 保存于液氮中

3、人牙源性干细胞培养条件是什么

人牙源性干细胞培养条件:

培养基:

含αMEM(阿尔法最小必需培养基)或DMEM(杜尔贝科氏最小必需培养基)

补充 1020% 胎牛血清 (FBS)

1% 抗生素抗真菌剂(如青霉素链霉素两性霉素 B)

生长因子:

表皮生长因子 (EGF)

成纤维细胞生长因子 (FGF2)

培养条件:

温度:37°C

二氧化碳浓度:5%

湿度:95%

培养皿:培养板或培养瓶

传代间隔:每 35 天

额外提示:

使用含酚红的培养基,以监测培养基的 pH 值。

培养基应在使用前新鲜配制。

定期更换培养基以去除代谢废物。

小心处理培养皿,避免机械损伤干细胞。

使用无血清培养基进行传代,以去除血清依赖性。

细胞融合会形成多能干细胞,在传代时应注意。

4、人源性干细胞及其衍生细胞

人源性干细胞及其衍生细胞

干细胞

未分化的细胞,具有自我更新和分化为各种专业细胞类型的潜力。

按发育阶段分类:

胚胎干细胞 (ESCs):从早期胚胎的内细胞团中获得。

诱导多能干细胞 (iPSCs):通过基因重编程从体细胞(例如皮肤细胞)中产生。

成年干细胞:存在于成年组织中,可产生特定类型的细胞。

人源性干细胞的衍生细胞

衍生细胞是通过干细胞分化产生的专业细胞类型。它们具有特定功能和组织分布。

ESCs 和 iPSCs 衍生的细胞

三胚层细胞:

外胚层(神经细胞、皮肤细胞)

中胚层(肌肉细胞、软骨细胞)

内胚层(消化道细胞、肝细胞)

其他细胞类型:

生殖细胞

造血干细胞

神经干细胞

成年干细胞衍生的细胞

血细胞:

红细胞

白细胞

血小板

上皮细胞:

皮肤细胞

肠道细胞

肺细胞

间充质细胞:

骨细胞

软骨细胞

脂肪细胞

应用

人源性干细胞及其衍生细胞在再生医学和疾病治疗中具有广泛的应用,包括:

组织修复和再生

疾病建模和药物筛选

细胞疗法(例如癌症免疫疗法)

个性化医学

挑战

人源性干细胞的使用也面临一些挑战,包括:

肿瘤形成的风险

免疫排斥(iPSCs)

伦理考量

标准化和可扩展性

研究正在进行中,以解决这些挑战,并充分发挥人源性干细胞的治疗潜力。

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