干细胞培养基国内厂家（间充质干细胞培养基怎么使用）
- 作者: 陈安芃
- 来源: 投稿
- 2024-12-11
1、干细胞培养基国内厂家
主要国内干细胞培养基厂家：
朗盛生物科技（上海）有限公司
睿翌生物科技（上海）有限公司
思瑞生物科技（苏州）有限公司
新基生物科技（苏州）有限公司
康普瑞生物科技（上海）有限公司
国药中生凯瑞康生物科技有限公司
科尔百生物科技（杭州）有限公司
杰特生物科技（北京）有限公司
顺变生物科技（上海）有限公司
世纪牌生物药业（南京）有限公司
2、间充质干细胞培养基怎么使用
间充质干细胞培养基的使用说明
材料：无血清间充质干细胞培养基
细胞培养瓶或培养板
无菌移液器和吸管
二氧化碳培养箱（37°C、5% CO2）
步骤：1. 准备培养容器：
将无菌细胞培养瓶或培养板预热至37°C。
加入适量的培养基，通常为每25 cm2培养面积加入510 mL。
2. 传代细胞：
取一张包含附着细胞的培养瓶。
用PBS清洗细胞两次。
加入消化酶（例如胰蛋白酶）并孵育1015分钟（37°C、5% CO2）。
用移液器轻轻吹打细胞以将其从培养瓶表面剥离。
加入无血清培养基（体积等于消化酶体积的23倍）以终止消化。
3. 离心细胞：
将细胞悬液转移到离心管中。
以每分钟300 x g离心5分钟。
移液丢弃上清液。
4. 重悬细胞：
用无血清培养基重悬细胞。
根据所需细胞浓度进行计数和稀释。
5. 接种细胞：
将细胞悬液接种到准备好的培养容器中。
轻柔摇晃培养容器以分散细胞。
6. 培养细胞：
将培养容器置于37°C、5% CO2的培养箱中。
每23天更换一半的培养基。
提示：无血清培养基不含生长因子或血清，为间充质干细胞提供清洁和定义的培养环境。
避免过度消化细胞，这可能会损伤细胞。
培养基的更换频率和体积应根据培养条件和细胞类型进行调整。
使用无菌技术以避免培养物污染。
3、干细胞培养基的功效与作用
干细胞培养基的功效
干细胞培养基是保持干细胞活力、分化和增殖所必需的优化培养液。其功效包括：
提供营养物质：含有生长因子、激素、氨基酸和其他营养素，以支持干细胞的代谢和生长。
调节pH值：缓冲液系统调节培养基的pH值，使其在干细胞生长所需的范围内。
促进细胞粘附：培养基中的成分，例如甲壳素或明胶，促进干细胞与培养皿的粘附。
抑制分化：特定的生长因子和抑制剂可以抑制干细胞的分化，使其保持未分化的状态。
促进增殖：培养基中的生长因子和促有丝分裂剂刺激干细胞增殖。
维持无菌环境：抗生素和抗真菌剂防止培养物受到微生物污染。
干细胞培养基的作用
干细胞培养基在干细胞研究和应用中发挥着至关重要的作用：
干细胞培养：提供最適宜的环境，以维持干细胞的活力、增殖和未分化状态。
干细胞分化：特定的培养基成分可以诱导干细胞向特定细胞类型分化。
组织工程：培养基支持工程化组织的生长和再生。
再生医学：干细胞培养基在基于干细胞的治疗中用于培养和制备可移植细胞。
药物测试：干细胞培养基用于培养细胞，用于评估候选药物和毒性的影响。
发育生物学研究：培养基用于研究胚胎干细胞的分化和早期的发育过程。
选择培养基的注意事项
选择干细胞培养基时应考虑以下事项：
干细胞类型：不同的干细胞类型需要特定的培养基成分。
培养阶段：培养基的组成可能随着干细胞培养阶段的不同而变化。
研究应用：特定应用可能需要优化培养基成分。
成本和可用性：培养基的选择应平衡其功效、成本和可用性。
4、间充质干细胞培养基配制
间充质干细胞培养基配制
材料：无血清培养基（如 DMEM/F12）
胎牛血清（FBS）
基本成纤维细胞生长因子（bFGF）
转化生长因子β1（TGFβ1）
胰岛素转移蛋白（ITS）
抗生素抗真菌剂（如青霉素链霉素）
步骤：1. 计算试剂量：
无血清培养基：所需体积（毫升）
FBS：10% 体积/体积 (v/v)
bFGF：10 ng/mL
TGFβ1：10 ng/mL
ITS：1% 体积/体积 (v/v)
抗生素抗真菌剂：根据制造商的说明
2. 按无菌技术操作。
3. 将 FBS、bFGF、TGFβ1 和 ITS 添加到无血清培养基中。轻轻涡旋混合，直到试剂溶解。
4. 添加抗生素抗真菌剂。
5. 将培养基转入无菌容器中。确保容器有足够的通气空间。
6. 储存：
4°C 下可储存 23 周
20°C 下可储存 612 个月
注意：不同的间充质干细胞类型可能需要不同的培养基成分。
试剂的浓度和生长因子的类型可能需要根据细胞类型进行优化。
建议定期更换培养基（每 23 天）。
使用无菌技术并监测培养基污染至关重要。
