干 🐎 细胞培养dmem(干细胞培养用什么培养 🕊 基)
- 作者: 刘嘉映
- 来源: 投稿
- 2025-03-17
1、干 🐯 细胞 🌷 培养dmem
干细胞培养 🌷 用 🐒 DMEM
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) 是一种 💮 专门配制用于培养干细胞 🐎 的培养基。它。提供了干细胞生长和增殖所需的必需营养素和生长因子
组分:无 🐵 血 🌾 清 DMEM 基础培养基
补 🐛 充 🐝 剂,包 🐠 括:
胎 🍀 牛血 🐅 清 🐦 (FBS)
白蛋 🕸 白 🦊
生长因子 🐶 ,如 bFGF 和 EGF
抗 🐱 生素抗/真菌剂
特点:无血清:去除了血清,从而减少了血清批次间变异的影响并降低污染 🐧 风险。
低细胞毒性:优化 🪴 的组分可最大限度地减少细胞毒性,促进细胞生长。
高生长因子含量:为干细胞提供了必需的生长因子,支 🐳 持它们的增殖和分化。
抗菌抗 🦄 /真菌成分:防止微生物污染,确保培 🕸 养物 🦈 的安全性。
应用:DMEM 用于培养各 🦊 种类型的干细胞,包括 🦄 :
胚胎干 🐞 细胞 (ESCs)
诱导 🌲 多 🦄 能 🐵 干细胞 (iPSCs)
骨髓间 🌺 充质干细胞 (MSCs)
神 ☘ 经干细胞
注意事项 🐯 :
培养基应储存在 4°C 下 🌿 。
使 🌹 用前将培养基预热至 37°C。
每 23 天更换一 🌳 次培养 🐴 基。
培 🌴 养基中生长因子的浓度根据干细胞类型而异。
2、干 🕷 细胞培养用什么培养基
干细胞培养基的选择取决于培 🦢 养的干细胞类型和目的。常见的干细胞培养基包括:
无血 ☘ 清 🌾 培 🌿 养基:
mTeSR? 系列(StemCell Technologies):用于人类胚胎干细 🌻 胞 (hESC) 和诱 🐴 导多能干 🌾 细胞 (iPSC) 的培养。
Essential 8? 培养基 🌿 (Thermo Fisher):用于人类胚胎干细胞 🌴 (hESC) 和诱导多能干细胞 (iPSC) 的培养 🌹 。
含血 🐡 清 🕊 培 🐧 养基:
αMEM 培养基(Thermo Fisher):含 🐵 10%20% 胎牛血清 (FBS),用于小鼠胚胎干细 🦉 胞 (mESC) 的 🐱 培养。
DMEM/F12 培养基(Thermo Fisher):含 10%20% 胎牛血清 (FBS),用 (于人成体干细胞 🌾 如间充 🌸 质干细胞) 的培养。
其他 🌻 成分 🌳 :
除上述基础培养基外,还,可以根据需要添 🌾 加其他成分例如:
生长 🦆 因 🐈 子:如 bFGF、EGF、LIF
抗 🐦 生素:如青霉 🐧 素链 🌵 霉素
L谷氨 🌷 酰 🐞 胺:作为能量来源
β巯 🌴 基乙醇:作为抗氧化剂
选择培养基的 💮 考虑因素:
干 🐱 细胞类型
培养目的 🦟 (如扩增、分化)
培养条 🦅 件(如细胞密度培养、时间)
建议咨询干细胞培养指南或与经验丰 🦄 富的干 🦈 细胞培养人员协商 🐒 ,以确定特定干细胞类型的最佳培养基配方。
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3、干细胞培 🐝 养基是什么
干 🍀 细胞 💮 培养基是一种专为支持干细胞增殖和分化而设 🌳 计的培养基。它含有各种成分,包括:
无血清培养 🐡 基:不含 🐒 血清,避免了可能存 🌴 在生长抑制因子和免疫反应。
生长 💮 因子:促进干细胞的增殖和分化,例如和 FGF、EGF PDGF。
抗生素:防止细 🐠 菌和其他微生物污染。
抑制剂 🐺 抑制:分化的因子,例如抑制剂 GSK3 和抑制剂 WNT 。
营养物质:葡萄糖、氨基酸和 🌲 维生素,为干细胞提供能量和基本营养。
干细胞培 🦍 养 🐺 基通常分 🌵 为两类:
基础培养基:维持干 🍀 细 🐧 胞非 🌻 分化状态的培养基。
分化培养 🐛 基:诱导干细 🐧 胞分化为特定细胞类型的培养基。
不同类型的干细胞需要特定的培养基配方 🐕 ,以满 🐯 足其独特的生 🐱 长和分化需求。
4、干细胞培养基配 🐵 方
干 🐼 细 🐺 胞培养基配方
基 🌹 本成 🦍 分 🍀 :
无血 🌹 清基础培养基(如 🐺 DMEM/F12 或 RPMI 1640)
胎 🐠 牛血清 🕊 (FBS)
生 🐝 长 🕷 因子:
人 🌷 重组表 🐋 皮 🕷 生长因子(rhEGF): 10 ng/mL
人重组碱性 🦉 成纤维细胞 🦊 生长因子(rhbFGF): 10 ng/mL
人血 🐼 小板 🐈 衍生生长因子(PDGF): 10 ng/mL
抗生素:青霉素链霉素混合物青霉素 🦈 :100 U/mL 和链霉素 100 μg/mL
二 🦈 丁 🍀 胺 🕷 :2 μg/mL
抗氧化 🐠 剂:
2巯基 🐵 乙醇:50 μM
其 🦈 他 🐬 成分 🦈 :
谷氨酰胺 🐋 :2 mM
MEM 非 💐 必需 🦆 氨基酸溶液 🌴 :1%
NEAA:1%
乙醇 💮 胺:10 μM
配制说 🐶 明:
1. 将无血清基础培 🌷 养基、FBS 和水加入无菌容器中。
2. 加入生长因子、抗 🐝 生、素抗氧 🌴 化剂和其他成分。
3. 搅拌以溶解所 🍁 有成分。
4. 过滤消毒并 🌿 分装至 🐈 无菌容器中。
使用 🍁 说明 🪴 :
将干细 🌻 胞 🐺 培养在使用前预热的培养基中。
每 🐧 23 天更换培养基,或根据需要更频 🐳 繁 🍀 地更换。
培养细胞时,保持 🐋 细胞在 37°C、5% CO2 和 100% 湿度 🕷 的 🐴 培养箱中。
注意:组分 🌺 浓度和配方可能因具 🌼 体细胞类型和培养条件而异 🌼 。
使 🌻 用高品质试 🌼 剂并遵循严格的无菌技术。
培养细胞时,定期监测细胞活力 🌲 和形态。