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干 🐎 细胞培养dmem(干细胞培养用什么培养 🕊 基)

  • 作者: 刘嘉映
  • 来源: 投稿
  • 2025-03-17


1、干 🐯 细胞 🌷 培养dmem

干细胞培养 🌷 🐒 DMEM

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) 是一种 💮 专门配制用于培养干细胞 🐎 的培养基。它。提供了干细胞生长和增殖所需的必需营养素和生长因子

组分:

🐵 🌾 清 DMEM 基础培养基

🐛 🐝 剂,包 🐠 括:

🍀 牛血 🐅 🐦 (FBS)

白蛋 🕸 🦊

生长因子 🐶 ,如 bFGF 和 EGF

🐱 生素抗/真菌剂

特点:

无血清:去除了血清,从而减少了血清批次间变异的影响并降低污染 🐧 风险。

低细胞毒性:优化 🪴 的组分可最大限度地减少细胞毒性,促进细胞生长。

高生长因子含量:为干细胞提供了必需的生长因子,支 🐳 持它们的增殖和分化。

抗菌抗 🦄 /真菌成分:防止微生物污染,确保培 🕸 养物 🦈 的安全性。

应用:

DMEM 用于培养各 🦊 种类型的干细胞,包括 🦄

胚胎干 🐞 细胞 (ESCs)

诱导 🌲 🦄 🐵 干细胞 (iPSCs)

骨髓间 🌺 充质干细胞 (MSCs)

经干细胞

注意事项 🐯

培养基应储存在 4°C 下 🌿

使 🌹 用前将培养基预热至 37°C。

每 23 天更换一 🌳 次培养 🐴 基。

🌴 养基中生长因子的浓度根据干细胞类型而异。

2、干 🕷 细胞培养用什么培养基

干细胞培养基的选择取决于培 🦢 养的干细胞类型和目的。常见的干细胞培养基包括:

无血 🌾 🌿 养基:

mTeSR? 系列(StemCell Technologies):用于人类胚胎干细 🌻 胞 (hESC) 和诱 🐴 导多能干 🌾 细胞 (iPSC) 的培养。

Essential 8? 培养基 🌿 (Thermo Fisher):用于人类胚胎干细胞 🌴 (hESC) 和诱导多能干细胞 (iPSC) 的培养 🌹

含血 🐡 🕊 🐧 养基:

αMEM 培养基(Thermo Fisher):含 🐵 10%20% 胎牛血清 (FBS),用于小鼠胚胎干细 🦉 胞 (mESC) 的 🐱 培养。

DMEM/F12 培养基(Thermo Fisher):含 10%20% 胎牛血清 (FBS),用 (于人成体干细胞 🌾 如间充 🌸 质干细胞) 的培养。

其他 🌻 成分 🌳

除上述基础培养基外,还,可以根据需要添 🌾 加其他成分例如:

生长 🦆 🐈 子:如 bFGF、EGF、LIF

🐦 生素:如青霉 🐧 素链 🌵 霉素

L谷氨 🌷 🐞 胺:作为能量来源

β巯 🌴 基乙醇:作为抗氧化剂

选择培养基的 💮 考虑因素:

🐱 细胞类型

培养目的 🦟 (如扩增、分化)

培养条 🦅 件(如细胞密度培养、时间)

建议咨询干细胞培养指南或与经验丰 🦄 富的干 🦈 细胞培养人员协商 🐒 ,以确定特定干细胞类型的最佳培养基配方。

3、干细胞培 🐝 养基是什么

🍀 细胞 💮 培养基是一种专为支持干细胞增殖和分化而设 🌳 计的培养基。它含有各种成分,包括:

无血清培养 🐡 基:不含 🐒 血清,避免了可能存 🌴 在生长抑制因子和免疫反应。

生长 💮 因子:促进干细胞的增殖和分化,例如和 FGF、EGF PDGF。

抗生素:防止细 🐠 菌和其他微生物污染。

抑制剂 🐺 抑制:分化的因子,例如抑制剂 GSK3 和抑制剂 WNT 。

营养物质:葡萄糖、氨基酸和 🌲 维生素,为干细胞提供能量和基本营养。

干细胞培 🦍 🐺 基通常分 🌵 为两类:

基础培养基:维持干 🍀 🐧 胞非 🌻 分化状态的培养基。

分化培养 🐛 基:诱导干细 🐧 胞分化为特定细胞类型的培养基。

不同类型的干细胞需要特定的培养基配方 🐕 ,以满 🐯 足其独特的生 🐱 长和分化需求。

4、干细胞培养基配 🐵

🐼 🐺 胞培养基配方

🌹 本成 🦍 🍀 :

无血 🌹 清基础培养基(如 🐺 DMEM/F12 或 RPMI 1640)

🐠 牛血清 🕊 (FBS)

🐝 🕷 因子:

🌷 重组表 🐋 🕷 生长因子(rhEGF): 10 ng/mL

人重组碱性 🦉 成纤维细胞 🦊 生长因子(rhbFGF): 10 ng/mL

人血 🐼 小板 🐈 衍生生长因子(PDGF): 10 ng/mL

抗生素:

青霉素链霉素混合物青霉素 🦈 :100 U/mL 和链霉素 100 μg/mL

🦈 🍀 🕷 :2 μg/mL

抗氧化 🐠 剂:

2巯基 🐵 乙醇:50 μM

🦈 🐬 成分 🦈 :

谷氨酰胺 🐋 :2 mM

MEM 非 💐 必需 🦆 氨基酸溶液 🌴 :1%

NEAA:1%

乙醇 💮 胺:10 μM

配制说 🐶 明:

1. 将无血清基础培 🌷 养基、FBS 和水加入无菌容器中。

2. 加入生长因子、抗 🐝 生、素抗氧 🌴 化剂和其他成分。

3. 搅拌以溶解所 🍁 有成分。

4. 过滤消毒并 🌿 分装至 🐈 无菌容器中。

使用 🍁 说明 🪴 :

将干细 🌻 🐺 培养在使用前预热的培养基中。

🐧 23 天更换培养基,或根据需要更频 🐳 🍀 地更换。

培养细胞时,保持 🐋 细胞在 37°C、5% CO2 和 100% 湿度 🕷 🐴 培养箱中。

注意:

组分 🌺 浓度和配方可能因具 🌼 体细胞类型和培养条件而异 🌼

使 🌻 用高品质试 🌼 剂并遵循严格的无菌技术。

培养细胞时,定期监测细胞活力 🌲 和形态。

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