河北小鼠心肌原代干细胞（小鼠心肌细胞系h9c2）
- 作者: 张北芸
- 来源: 投稿
- 2024-12-11
1、河北小鼠心肌原代干细胞
河北小鼠心肌原代干细胞
定义河北小鼠心肌原代干细胞是由河北医科大学心血管研究所分离、培养并表征的一种来自小鼠心肌的心肌干细胞（CMSC）。
来源这些细胞从新生小鼠的心肌中分离获得。
表征河北小鼠心肌原代干细胞已通过一系列标记和功能检测进行表征：
标记物表达：表达心肌干细胞特异性标记，如cKit、Sca1、CD34 和 CD45。
分化潜力：能够分化为心肌细胞、平滑肌细胞和内皮细胞。
心脏修复能力：在心肌梗塞模型中注射这些细胞已被证明可以改善心脏功能和减少梗塞面积。
应用河北小鼠心肌原代干细胞具有以下应用潜力：
心脏修复
心脏再生
心衰治疗
心血管疾病的研究
优势与其他类型的心肌干细胞相比，河北小鼠心肌原代干细胞具有以下优势：
易于获取和分离
高扩增能力
良好的分化潜力
免疫原性低
注意事项如所有干细胞类型一样，在使用河北小鼠心肌原代干细胞之前，必须仔细考虑以下注意事项：
伦理问题：涉及动物实验
致瘤性：干细胞有潜在的致瘤性风险
免疫排斥：可能会发生患者与供体之间的免疫排斥反应
结论河北小鼠心肌原代干细胞是一种有前景的新型心肌干细胞，具有心脏修复和再生、心衰治疗和心血管疾病研究的潜力。
2、小鼠心肌细胞系h9c2
小鼠心肌细胞系 H9c2
简介H9c2 细胞是源自小鼠胚胎心肌的永生化细胞系。
它们以其广泛用于心肌细胞生物学、药理学和疾病建模研究而闻名。
特性心肌样分化：H9c2 细胞能够分化成具有心肌细胞样特征的细胞，包括肌丝蛋白表达、收缩活性以及对心肌收缩剂的反应。
电生理特性：H9c2 细胞表现出心肌细胞类似的电生理特性，包括动作电位和钙离子流动。
增殖能力：H9c2 细胞在体外培养中具有无限增殖的能力。
药物敏感性：H9c2 细胞对各种心脏药物敏感，包括离子通道阻滞剂、收缩调节剂和抗心律失常药物。
应用心肌生理学和药理学：研究心肌细胞功能、药物机制和疾病病理生理学。
心血管疾病建模：创建心脏病、心力衰竭和其他心血管疾病的细胞模型。
药物筛选：筛选对心肌细胞功能有影响的新型药物候选物。
再生医学：探索心脏组织再生和修复策略。
优点易于培养和操作。
与心肌细胞具有相似的特性。
在体外可预测药物对心脏的影响。
便于进行分子和遗传操作。
局限性不是原代细胞，因此不能完全反映心肌细胞的全部特性。
可能不代表心脏中所有类型的心肌细胞。
长期培养时可能会失去某些分化特征。
3、小鼠心肌细胞分化试剂盒
小鼠心肌细胞分化试剂盒
产品说明小鼠心肌细胞分化试剂盒是一种体外细胞培养系统，用于将小鼠胚胎干细胞 (ESC) 或诱导多能干细胞 (iPSC) 分化为功能性心肌细胞。该试剂盒包含一系列生长因子和化学试剂，可指导干细胞从多能干细胞状态逐渐成熟为心肌细胞。
主要特点高效：产生纯度高、成熟的心肌细胞
可重复：可靠且可预测的结果
易于使用：提供分步指南和所有必要的试剂
快速：可在 1014 天内获得分化的心肌细胞
应用心血管疾病研究
心肌损伤模型
药物筛选
心脏组织工程
试剂盒内容
心肌分化培养基
生长因子混合物
抗生素附着基底
培养板使用指南
1. 细胞接种：将 ESC 或 iPSC 接种到涂有附着基底的培养板上。
2. 培养基添加：添加心肌分化培养基，并遵循分步指南中的培养时间和培养条件。
3. 培养和分化：定期更换培养基，并在指示的时间点添加生长因子混合物。
4. 分化评估：使用免疫荧光、流式细胞术或电生理学分析来监测心肌细胞的分化。
结果分化的细胞显示心肌细胞标记物的表达，例如肌动蛋白和肌钙蛋白。
细胞具有自发收缩的能力，表明心肌收缩性。
分化的细胞可响应心脏类药物，例如异丙肾上腺素。
注意事项该试剂盒仅供研究用途，不得用于诊断或治疗。
严格遵守使用指南以获得最佳结果。
处理细胞时要小心，并使用适当的个人防护设备。
4、成年小鼠心肌细胞提取
成年小鼠心肌细胞提取
材料：成年小鼠 (68 周龄)
1x 磷酸盐缓冲液 (PBS)
0.05% 胰蛋白酶溶液
0.25% 胰蛋白酶溶液
DMEM 培养基，含 10% FBS
DNase I (100 U/mL)
70% 乙醇
传代培养瓶或平板
步骤：1. 准备小鼠：
对小鼠进行剖腹麻醉。
收集心脏组织并置于 1x PBS 中。
2. 心肌细胞分离：
将心脏组织切成小块（约 12 毫米）。
将组织块转移到含 0.05% 胰蛋白酶溶液的培养皿中。
在 37℃ 孵育 5 分钟，并轻柔振荡。
3. 胰蛋白酶消化：
去除胰蛋白酶溶液并用含 0.25% 胰蛋白酶溶液的 DMEM 培养基补充。
在 37℃ 孵育 1520 分钟，并轻柔振荡。
4. 终止消化：
加入等体积的含 10% FBS 的 DMEM 培养基，以终止消化。
通过 70% 孔径滤器过滤细胞悬液。
5. 离心沉淀细胞：
以 4°C 和 300 x g 离心 5 分钟。
去除上清液，并用 1x PBS 洗涤细胞。
6. DNase I 处理：
向细胞悬液中加入 DNase I (100 U/mL)，并孵育 10 分钟。
再次离心细胞并用 1x PBS 洗涤。
7. 培养：
将细胞悬液接种到传代培养瓶或平板中，初始密度为 50,000100,000 个细胞/mL。
在 37℃ 和 5% CO2 的环境下培养细胞。
提示：仔细进行手术和组织处理，以避免细胞损伤。
使用新鲜制备的胰蛋白酶溶液。
在消化过程中轻轻振荡组织块，以促进酶渗透。
定期显微镜观察细胞，以监测其健康状况和粘附情况。
