肿瘤组织分离肿瘤 🦅 干细胞（肿瘤干 🐯 细胞分化及去分化）
- 作者: 刘默尧
- 来源: 投稿
- 2025-03-17
1、肿瘤组织分离肿 🌷 瘤干细胞
肿瘤组织分离肿 🐒 瘤干 🌳 细 🌵 胞
简介肿瘤干细胞（CSCs）是具有自我更新和分化能力的肿瘤细胞亚群。它们对肿瘤的起始、进。展和治疗耐药起着至关重要的作用分 🐠 离有 CSCs 助、于。深入了解肿瘤生物学开发靶向疗法和监测治疗反应
方法从 ☘ 肿瘤组织分离 CSCs 的方法有多种 ☘ ：
1. 细 🐵 胞表面标记法
使用特异性抗体靶向 CSCs 上 🐞 的细胞表面标记，例如 CD44、CD133 和 ALDH1A1。
通过流式细胞术或磁性细胞分选分 🐧 （MACS）离标记的细胞。
2. 侧群细 🐞 胞分选 🐒
利用 🐧 流式细胞术将侧群细胞（SP）与非侧群细胞（NSP）区分开来。
SP 细胞通常富含 CSCs，因为它 🐳 们 🐺 具有高 🐕 效的药物外排能力。
3. 球体形成检测 🌸
将肿瘤细胞接种到无血清培养基中，形 🌾 成球体无（支架生长）。
球体形成细胞被认为是富 🦊 含 CSCs 的亚群 🌿 ，因为它们具有自我更新和分化 🌼 的能力。
4. 类 ☘ 器 🌷 官 🌹 培养
将肿瘤组 🐞 织切成小块并培养在三维基质 🦅 中。
类器官保持肿瘤组 🌿 织的异质性和功能，包括 🌺 的 CSCs 存 🦉 在。
5. 克隆形 🐶 成 🐘 检测 🐝
将肿 🐘 瘤细胞接种到 🌾 培养皿 💮 中形成克隆。
形成克隆的细胞 🦍 被认为具有自我更新和分化能力，类似于 CSCs。
验证分离后的 🍁 CSCs 应通过以下方法进 🐦 行验 🌹 证：
细胞表面标记 🐝 表达：检测 CSC 特异性标记的存在 🦉 或增加。
球体形成：分离的细胞应具有 🐶 形成球体的能力。
类器官形成 🍁 ：分 🐟 离的细胞应能够形成异质 🐡 性类器官。
致瘤性：分离 🐞 的 🌴 细胞 🌼 在移植到动物模型后应产生肿瘤。
应用分离 CSCs 的应 🐦 用包括：
肿瘤 🦆 生物学研究：了 🌺 解 CSCs 的作用、机制和 🐳 异质性。
靶向疗法开发开发 🦁 ：针对 CSCs 特 🕷 异性 🐋 特性的治疗方法。
治疗响应监测：评估 CSCs 在治疗中的变化，以调整治疗策略 🐠 。
预后预测：将 CSCs 的存在或数量与肿瘤 🌸 进展和预后联系起 🦅 来。
2、肿瘤干细胞分化 🐞 及去分化
肿瘤 🕊 干 🪴 细胞 🐕 分化
肿瘤干细胞 (CSC) 是一级干细胞，具，有自我更新 🐶 和分化 🐱 的能力被认为是肿瘤的 🍀 起源细胞的分化。CSC 决。定了肿瘤的异质性和侵袭性
CSC 分化 🐞 的过程受到多种信号通路和转 🐱 录 🪴 因子的调控，其中包括：
Wnt 信号通路：抑制分化，促进 🍁 细胞 🐳 增 🐒 殖。
Notch 信号通 🐝 路：调节细胞命运，抑制分化 🐛 。
Oct4 和 Sox2 等转录因子：维持 CSC 的自我更 🌵 新和未分化状态。
CSC 去分 🍁 化
CSC 也可以发生去分化，即从分化状态回归到未分化状态 💐 去分化。的 💐 CSC 恢 🐧 ，复 CSC 了。自我更新能力并可以产生新的和分化细胞
CSC 去分化的过程也受到信号通路和转录因子的 ☘ 调控，其中包括：
TGFβ 信号通 🐺 路：促进去分化和上皮间质转化 (EMT)。
Hedgehog 信号通路 🐺 ：抑制分化，维持 🐼 CSC 状态。
cMyc 转录因子：抑 🦊 制分化，促进 CSC 自我更新。
分化和 🕊 去分化 🌸 在肿瘤进展中的 💐 作用
CSC 分化和去分化在肿瘤进展中起着至关重要 🐈 的 🦢 作用：
肿瘤异质性：CSC 分化产生不同的癌细胞 🦉 亚群，导致 🌳 肿瘤异质性增加。
肿瘤侵袭性：CSC 去分化可以产生具有更 🌾 高侵袭性和转移能力的癌细胞。
治疗耐药性：CSC 可以通过分化和去分 🦉 化规避治疗，导致治疗耐药性。
因此，理解肿瘤干细胞分化和去分化 🐅 机制对于开发针对 CSC 的，治疗策略至关重要从而提高癌症患者的预后。
3、肿瘤干细胞 🐈 可以分 🍁 化吗
是 🐡 的，肿瘤干细胞可 🦅 以分化。
肿瘤干 🦉 细胞是一个亚群细胞，具有自我更新和分化形成异质性肿瘤细胞的能力分化是。指肿瘤干 💐 细胞。转变为更具特 🦋 化的细胞类型
分化的过程受多种因素调节，包括微环境、细胞信号分子和表观遗 🐝 传修饰。肿，瘤干细胞可以分化为不同的亚型包括：
增殖性细胞 💐 ：继续自我更新和维持肿瘤干细胞库。
中 🐞 间祖细胞：分化为更成熟的细 🍀 胞类型。
成熟的癌细胞：具有 🍀 特 💮 化的功能和侵袭 🐬 性。
肿瘤干细 🕊 胞 🕸 分化对于肿瘤的生长、转移和治疗耐受性至关重要。
4、肿瘤 🍁 干细胞分离方法
肿瘤 🐎 干细胞分离方法 🦟
肿瘤干细胞 (CSC) 是具有自我更新和产生肿瘤异质性的能力的稀有细 🐒 胞群 🐵 。分离 CSC 至关重要，因为它可用于研究肿瘤发生、制。定 CSC 靶向疗法和监测治疗反应以下是一些常用的分离方法：
1. 流式 ☘ 细胞术分选
基于表面标记：使用特异性抗体标记表面 CSC 随 🌹 ，后通过流式细胞仪分选。
基 🐝 于功能标记：利用 CSC 的特定功能（例如，药物外排或侧向群体性质）进 🐴 行分选。
2. 肿瘤球类形 🌷 成检测 (SCFA)
培养肿瘤 🌷 细胞悬液，形 🕊 成富含 CSC 的 🌷 肿瘤球类。
肿 瘤球类可进一步扩增或分析 🌳 。
3. 免疫磁性分 🦟 选 (IMS)
用标记有磁珠的抗体标记 CSC，然后 🌺 使用 🐋 磁场分离。
这种方法效率 🐕 高，但磁珠可能干扰 🐛 后续分析。
4. 肿瘤细胞异种移植 🌷 (xenotransplantation)
将肿瘤细胞移植到免疫缺陷小鼠中，形 🐕 成 🕊 肿瘤。
肿瘤中富含 CSC，可 🐎 用于分选和分析。
5. 克隆 🐳 分 🐋 选
将单细胞克隆化并分 🦍 析其肿瘤 🦅 形成能力。
形成 🦋 肿瘤的克 🍀 隆很可能包含 CSC。
6. 细 🐱 胞 🐝 内分选 (FACS)
直接从活细胞中分选 CSC，避免使 🌵 用抗 🐡 体或其他标记。
这提供了对 🪴 CSC 纯度的更精确控制。
7. 非凋亡分 🐼 选
鉴别对凋亡信号具有抗性的 🐳 CSC。
这是分离具有治疗抗性的的 CSC 一种 🌲 有希望的方法。
选 🐧 择方法时要 🌼 考虑的因 🦅 素：
肿 🐝 瘤类型和 🍁 CSC 亚群
样本量 🐒 和完整性
分 🐼 离效率和纯度
后 🦢 续分 🐳 析和 🌷 应用
通过使用这些 🐯 方法，研究人员可以分离出纯化的 CSC 群，体这有助于深入了解肿瘤生物学和开发 🦄 新的治 🐵 疗策略。
