流式 🐎 测肠干细胞指数（造血干 🌿 细胞流式检测结果分析）
- 作者: 王玄铮
- 来源: 投稿
- 2025-03-03
1、流式测 🌳 肠干细胞指 🌲 数
流式测肠干 🌵 细 🌺 胞 🌿 指数 (FUCI)
FUCI 是一种量化肠干细胞 (ISC) 功能的定量分析 🐠 方法。它基于流式细胞术一种，用于测量细胞数量 🦋 、大。小和荧光强度的技 🕸 术
原理:ISC 是一种罕见的干细胞，存在于肠道隐窝的底部。它，们不断分裂以产 🌲 生新的肠道细胞从而更新肠道内层。FUCI 利用的 ISC 独。特表面标记和荧 🐈 光染料来识别和量化这些细胞
流程:1. 组织采 🦈 集: 从小肠或大肠中获取组织样本。
2. 组织解离: 将组织 🐳 解离成单个细胞 🐬 ，以进行流式细胞术分析。
3. 表面标记: 使 🐘 用抗体标记 ISC 特异性表面 🌻 标记，例如 Lgr5 或 Bmi1。
4. 荧光染料: 使用 DNA 结合染料染料细胞核，以区 🍁 别干细胞和分 🦢 化细胞。
5. 流式细胞术: 将细胞悬浮液通过流式细胞仪，测量 🦟 细胞计数、大小和荧光强 🐝 度。
分析:流 🐡 式细胞仪数据用于绘制细胞群图，显示细胞计数相对于表面标记和荧光强度的分布群。ISC 通过其特征性表面标记和高 DNA 含。量来识别
计 🦟 算 FUCI:
FUCI 是流式细胞图中 ISC 群计数 🐴 的比率。通常以百分比表示表示，在 ISC 总细胞群中。所占的比例
意义:FUCI 可用于评 🐺 估 🦄 以下内 🐳 容：
ISC 功能: FUCI 高 ISC 表明增殖和分 🐘 化活跃。
肠道健康: FUCI 降低可能 🐋 表明 ISC 受损或肠道 🐟 疾病。
再生潜力: FUCI 可用于预测肠 🐶 道在损伤后的再 🌴 生能力。
治疗反应: FUCI 可用于监测 ISC 对治疗的反应，例如化疗或干细胞移 🐘 植。
FUCI 是研究肠 🌺 道干细胞生物学和肠道疾病的宝贵工具。它提供了定量测量 ISC 功能的方法，并。有助于了解肠 💮 道更新和修复过程
2、造 🦢 血 🌺 干细胞流式检测结果分析
造血干细 🦈 胞流式检测结果分 🐶 析
目的：鉴 🐛 定和 🌷 表征造血干 🌷 细胞（HSC）群
评估 ☘ HSC的 💮 纯度、活 🐺 、性分化潜力
方法：1. 样本采集：骨髓、外周血 🦉 或脐带血
2. 细胞分离 🦉 ：层 🌾 析分离或磁珠分离 🐬 ，富集HSC
3. 流式 🐼 细胞术：使用特 🐅 异性抗 💮 体，检测HSC表面标记物的表达
4. 数据分析：使用流式细胞术软件对数据进行 🌹 分析，鉴定 🐎 HSC群
标记物：表征造血干细胞 🦆 的 🦅 典型表面 🐴 标记物包括：
淋 🐼 巴 🐠 细 🦊 胞谱系：CD34、CD133、CD117 (ckit)
髓细 🌹 胞 🐯 谱 🐞 系：CD33、CD15
排除 🦍 淋巴细胞和髓 🐝 细 🦋 胞：CD19、CD3、CD45RA
分 🦄 析 🌴 步 🐬 骤：
1. 门控策略：基于已知标记物表达模 💮 式，建，立多组门鉴定目标群
2. 四分图分析：将标记物表达数据绘制在四分图中，以可视化不同细胞群 🌼
3. 群边缘：使用特 🦁 定算法 🌵 或手动设定群边缘定，义目标细胞群 🐠
4. 统计分析计：算HSC群的百分比、绝对计 🦍 数和平均 🦊 荧光强度（MFI）
结 🐒 果解 🌿 读：
流式 🌲 细胞术结果可提供以下信息：
HSC纯度：目HSC标 🐈 群中百 🐎 分 🌼 比，反应了选择的有效性
HSC活性：HSC表面标记物的表达水平 🐧 ，与细胞活性相关
HSC分化潜力：基HSC于亚群的标记 🕸 物表达模 🐕 式，推测其分 🦋 化潜力
正常值 🐼 范围：不同来 🕸 源的HSC群，其正常值范围，可能有所不同需要参考文 🌼 献或建立内部对照
应用：造血干细胞流式检测结果分析在以下 🐠 领域具有重要意义：
干细胞移植：鉴定和分选适 🦟 宜移 🐕 植 🪴 的HSC，提高移植成功率
再 🐵 生医学：研 🐋 究HSC的分化和再 🦆 生能力
疾病诊 🕷 断：监测血液系 🕊 统疾病中HSC的状态变化 🦆
药物开发：筛选和评估促进或抑制HSC功能的化合物 🦄
3、流式细胞仪能检测大肠杆菌 🐘 吗 🌼
是的，流 🦆 式细胞仪可以检测大肠杆菌。
流式细胞仪是一种用于测量和分析细胞大小、形状和内部复杂性的仪器。它还可以检测细胞表面或内部的特定分子，例 🐦 。如抗原 🌵 或受体 🐴
为了检测大肠杆菌，可以将流式细胞仪与荧光标记的抗体结合使用抗体。是专门识别和结合特定分子（在这种情况下是大肠杆菌表面的抗原的）蛋。白，质，当抗体与大肠杆菌结合。时它们会发出荧 🕊 光信号该信号可以由流式细胞仪检测到
通过分析荧光信号，流，式细胞仪可以量化样本中大肠杆菌的浓度并根据特定抗原的 🌹 表达对大肠杆菌进行表征。
4、造血干细胞流 💮 式检测方案
造血干细胞（HSC）流式检测 🌷 方案
目 🦍 的：分离和鉴定骨髓或外周血 🐝 中的造血干 🌵 细胞（HSC）。
试剂：抗 🌿 抗CD34 体（APC 标 🐟 记 🌷 ）
抗 🐕 抗 🐶 CD38 体（FITC 标 🌹 记）
抗 🍁 抗 🐡 CD90 体（PE 标 🐬 记）
抗 🐠 抗CD45 体（PerCPCy5.5 标记）
抗体稀释 🐴 液（PBS，0.5% BSA）
流式细 🐦 胞 🐺 仪 🌿
流 🐞 式鞘 🐞 液 🦋 （PBS，0.1% BSA）
步骤：1. 细 🌼 胞 🍁 制备 🌿 ：
骨髓或外周血 🍁 样本中 🦍 提取单核细胞 🐯 。
离心去 🌳 除细胞残渣，洗涤细胞。
2. 抗体孵 🐅 育：
将细胞 💮 悬浮液等分到试管 🐧 中。
加 🐦 入含抗体的抗体稀释液，并孵育 20 分钟，4°C。
抗 💮 体浓度：
抗 🌵 抗 🪴 CD34：10 μL 体 🐡 /100 μL 细胞
抗抗CD38：5 μL 体/100 μL 细 🐘 胞 🦢
抗 🐺 抗 🐡 CD90：5 μL 体/100 μL 细 🐞 胞
抗 🐳 抗CD45：2 μL 体 🦉 /100 μL 细胞
3. 洗 🦍 涤 🐅 ：
用流式鞘液洗涤细 🐬 胞两次，每次离心 5 分钟，4°C。
4.流式细胞分析 🐼 ：
将细胞悬浮液重悬 💐 于流式鞘液中。
使用流式细胞仪 🕊 采集数据 🐛 。
5. 数 🐯 据 🌻 分 🦅 析：
使用流式 🐡 细胞分析软件对数据进行分析。
根据以 🐅 下 🍁 门策略鉴定 🌹 HSC：
CD45+ (排除非 🦉 造血细 🐱 胞)
CD34+ (表 🐵 达 HSC 标 🐵 志物 🐒 )
CD38 (HSC 亚 🐡 群 🌷 )
CD90+ (HSC 亚群 🐳 )
注意事项 🐋 ：
优化抗体浓度 🕷 以获得最佳染 🐯 色结果。
使用合适的对照品（未标记细胞或同种型抗 🐋 体）进行对照。
保持样本温 🕊 度在 4°C 以防止细胞激活和漂移。
