小 🐒 鼠多能充质干 🦢 细胞（小鼠骨髓间充质干细胞培养）
- 作者: 李穆川
- 来源: 投稿
- 2025-03-19
1、小 🐦 鼠多能充质干细胞
小鼠多能 🐳 充质干细胞 🌳 (MMSC)
定义：小鼠多能充质干细胞 (MMSC) 是一类从多种小鼠组织中分离得 🪴 到的间充质干细胞，具，有自我更新和多向分化能力能够分化为 🕊 脂肪、软、骨骨和肌肉等多种组织。
来源：MMSC 可以从骨髓、脂、肪、组织肌肉牙髓和滑膜 🐶 等组织中分离获得。
特性：自我更新：MMSC 在体 🍀 外培养条件下能够自我复制和 🐠 增殖。
多向分化：MMSC 具 🦉 有分化 🌼 为脂肪、软、骨骨和肌肉等间叶系组织的能力。
免疫调节：MMSC 具有免疫调节 🕊 特性，能，够抑 🐳 制免疫反应促进组织再生。
归巢能力能：MMSC 够 💮 归巢至受损组织，并参与修复和再生过程。
应用：MMSC 在组织修复组织、工程和再生医学领域 🐈 具有广 💮 泛的应用前景：
组织修复：MMSC 可用于修复心肌梗死、脑、损伤脊髓 ☘ 损伤等组织损伤。
组织工 🌸 程：MMSC 可用于构建骨组织、软骨组织、血管组织等人工组织。
再生医学：MMSC 可用于 🐅 治疗老年性疾病、自 🐴 身免疫性疾病和癌症等疾病。
研 🐵 究进展：
近年来 🐝 ，MMSC 研，究 🦉 取得了显著进展包括：
分子机制：科学家们正在研究 MMSC 的分子机制，以了解其自我更新分、化和免疫 🐕 调节能力。
临床应用：MMSC 正在 🐈 进入临床试验阶段用，于 🌺 治疗各种 🐦 疾病。
异种 🕷 移植：研究人员正在探索将移植 MMSC 到人类患者的可能性，以扩大其治疗 🐵 潜力。
MMSC 是一类具有巨大应用前景的多能干细胞，在组织修复组织、工程和再生医学领域具有广泛的应用潜力。随着研究的深 🐦 入的应用，MMSC 范。围和治疗效果有 🐛 望进一步扩大
2、小鼠骨髓间充质干细胞 💐 培养
小鼠骨髓间充 🐟 质干细胞培养
材料：细胞：
小鼠骨髓单核细胞 🐬 悬液
培养基：αMEM 培 🐯 养 🍁 基
10% 胎 🦟 牛血 🐟 清 🐱 (FBS)
1% 青 🐯 霉素链霉素抗生 🐝 素
培养皿：10 cm 培 🦆 养 🐋 皿 🐈
试剂：0.25% 胰蛋白 🐟 酶EDTA 溶液
PBS红细胞 🪴 裂解 💮 溶液
设备：层流罩
培 🐋 养 🐵 箱 (37°C, 5% CO2)
细 🐼 胞计数仪
离心机操 🐕 作 🐟 步 🦁 骤：
1. 分离小鼠骨髓单 🦋 核细 🐯 胞
杀死小鼠，取出股 🌼 骨和 🐎 胫骨 🐠 。
用无菌剪刀剪开两端，小心 🐟 取 🐘 出骨髓。
将骨髓 🦈 转移到含有 PBS 的 50 mL 离心管中。
离 🐦 心 🦈 5 分钟 🐡 ，1200 rpm，4°C。
吸 ☘ 出 🌿 上清液，弃去 🐧 。
加入红细胞裂解溶液，孵育 10 分，钟，室 🐠 温轻轻混匀。
离心 5 分 🌵 钟，1200 rpm，4°C。
吸出上 🌷 清 💮 液，弃去 🐛 。
用 PBS 洗涤 ☘ 沉淀 🐳 物两次。
2. 培 🐒 养 🌵 基培养 🌷
将单核细胞 🐞 悬液重悬于 αMEM 培养基 + 10% FBS + 1% 青霉素链霉素抗生素中。
将细胞悬液接 🐅 种到 10 cm 培 🐘 养 🦁 皿中，每皿约 25 x 10^6 个细胞。
将培养皿置于培养 37°C，5% CO2 箱 💐 中培养。
3. 更 🌸 换 🐟 培养 🌼 基
每 🐋 23 天更换一次培养基，或者当培养基变黄时更换 🐡 。
轻轻吸出旧培养基，避免扰 🕷 动细胞。
加入新鲜 🐎 的培 🐶 养 🦄 基。
4. 传代 🐘 培 🦆 养
当细胞达到 8090% 汇合 🐺 度 🦄 时，传代培养。
吸出 🌹 培养基，用 PBS 洗涤一次 🐳 。
加入 0.25% 胰蛋白酶EDTA 溶液 🌳 ，孵 🦟 育 510 分 🌳 钟，37°C。
用培养基终 🐬 止胰蛋白酶活性，并用细胞计数仪计数细胞。
传代细 🦈 胞至新的培养皿中，每 🦋 个培养皿 10 cm 接种个细胞 510 x 10^5 。
提示：使用新鲜且污 🍁 染 🐦 情 🌻 况少的材料和试剂。
在无菌操作条件下进行 🐶 所 🐎 有操作。
定期监测细胞生 🐈 长 🌼 并更换培养基。
根据细胞状 🌲 态调整传代时 🦉 间和胰蛋白酶孵育时间。
3、小鼠多能充质干细胞培养 🐋 吗
是的，小鼠多 🐴 能充质干细 🦊 胞（mMSCs）可以培养。
培养 mMSCs 的 🌵 步骤通常包括：
1. 分离和扩增：从骨髓、脂肪组织或其他来源中分离 🦢 mMSCs，并在 ☘ 培养 🐟 基中进行扩增。
2. 贴壁培养：将贴壁培养 mMSCs 在特定培养基中，例如含血清的低糖培养 🍁 基。
3. 培养基更换：定期 🦊 更换培养 🌾 基以去除废物和提供营养。
4. 传代 🐼 ：当细胞增殖并达到一定的密度时，进行传代以获得更多的细胞。
培养 mMSCs 需 🐛 要注意以下事项：
培养基：选择适当的培养基，例，如 🐱 含 🦄 血清的低糖培养基以支持的 mMSCs 增 🦟 殖和分化。
贴壁表面：使用适合 🌻 贴壁 mMSCs 的 🐟 表面，例如聚苯乙烯培养皿或带有涂层的培养基 🌴 板。
无菌操作：始终保持无菌操作 🦆 以防止细胞 💐 污染。
传 🌾 代时限：定期进 🌾 行传代，但，避 🦆 免传代次数过多以维持 mMSCs 的多能性。
通过优化培养条件，可 🍀 以成功培养 mMSCs，并用于 🐧 研究、再生医学和治疗应用。
4、小鼠 🐺 多能充质干细胞移植吗
可 🐼 以移植。
小鼠多能充质干细胞 (mMSCs) 是一 🌿 种间充质干细胞，可，以从多种组织中分离包括骨髓、脂、肪组织牙髓和脐带。mMSCs 已，被。广泛用于动物模型中的再生医学研究包括移植到小鼠体内
mMSCs 移植到小鼠体内后，可，以，归巢到损伤或 🐯 疾病部位并分化为多种细胞类型如骨细胞、软骨细胞和 🍀 脂肪细胞。它，们。还具有免疫调节和抗炎 🐞 特性这有利于组织修复和再生
mMSCs 移植可以用来治疗各种小鼠疾病模型，包括骨缺损、软骨损、伤、心脏病神经损 🐶 伤和自身免疫性疾病移植。的，方、法。取决于目标组 🐘 织和疾病类型通常包括直接注射局部注射或静脉注射
在小鼠模型中，mMSCs 移植已被证明是安全的和有效的移植。后，的。细，胞，mMSCs 通常存活并分化为适当的细胞类型有助于受损组织的再生和功能恢复 🌺 与任何细胞移植一样在临床应用之前移植需 🍀 要进一步评估其安全性有效性和、长。期结果
