造血干 🐯 细胞小鼠耳朵（小鼠骨髓造血干细胞染色体的制备和观察实验报告 🐅 ）
- 作者: 马芊桐
- 来源: 投稿
- 2025-04-03
1、造血干细胞小鼠 🐋 耳朵
造血干细胞小鼠耳 🪴 朵模型
造血干细胞小鼠耳朵模型是通过在小鼠耳朵上植入人造血干细胞而创建的。这种模型用于研究人类造血 🌵 和免疫系统 🐧 疾病，包。括白血病和淋 🐒 巴瘤
创建造血干细胞小鼠 🐴 耳朵模型
1. 准备小鼠：选择免疫缺陷 🌲 小鼠，例如小鼠 NSG 其缺，乏正常的免疫系统。
2. 培养人造血干细胞：从健康供者或细胞系 🐈 中分离人造血干细胞并体外培养。
3. 植入人造血干细胞：将人造血干细胞注射 🦁 到小鼠的耳朵皮下组织中。
4. 重建 💮 人造血系统：经过几周人造血，干，细胞将在小鼠耳朵中分化成各 🐎 种血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。
模型 🌷 的特 🐧 点 🦈
小鼠耳朵耳朵小：而透明，可 🦁 用于 🌼 通过显微镜直接观察新形成的血细胞。
人 🍁 造血系统：该模型重建了具有功能 🦁 性人红细胞、白细胞和血小板的人造血系统。
免疫缺陷小鼠免疫缺陷小鼠：的缺乏免疫系统允许人造血细胞在 🦉 不发生排斥反应的情况下 🐳 生长。
模型 🐯 的 🕊 应用
造血干 🌼 细胞小鼠耳朵模型已被用于研究：
造血干细胞移植 🪴 和再生
白 🌷 血病和 🐧 淋 🪴 巴瘤的发病机制
新型抗癌疗 🌵 法 🐕 的 🐡 评估
人类免疫 🦈 系统疾 🦟 病
优点方便观察：耳朵小而透明便，于观察造血 🐛 。
快 🐼 速建 🌲 立：人造血系统可在几周内 🌳 建立。
可重复性和一致性 🦍 ：耳模型是高度可重复和一致的。
缺点移植物抗宿主病移植：的人造血干细胞会攻击小鼠，可能导 🌹 致移植物抗宿主病。
物种特异性 🐺 ：该模型仅允许研究人类造血，不适用于研究小鼠 🌹 特异性疾病。
2、小鼠骨髓 🐝 造血干细 🌷 胞染色体的制备和观察实验报告
小鼠骨髓造血干细胞染色体的制备和观 🦈 察实 🕊 验报告
实验目的了解小鼠骨髓造血干细胞染色体的 ☘ 制备和观察方法，掌握染色体分析的基本技术。
实验材料动物材料： C57BL/6 小 🐅 鼠
试 🦄 剂材 🐅 料：
PBS（磷酸 🌹 缓 🐯 冲液）
10% 血 🦍 清 🦈 FBS
RPMI1640 培 🐺 养 🐶 液 🌼
2% PFA（多 🕊 聚甲醛）
0.1% Triton X100
DAPI 染色液 🍁
盖玻片 🐴 、载 🐒 玻 🌷 片
仪器设备 🐼 ：
超净工作 🪴 台
离心机荧光显 🦢 微镜 🌴
实验步骤一、骨髓 🐠 细胞 🐵 分离 🐼
1. 处 🐟 死小 🐺 鼠，取出股 🌾 骨和胫骨。
2. 在超净工作台中用 PBS 冲洗骨骼 🍀 表面。
3. 两端剪开 🌳 骨骼，用 🕷 PBS 冲 🐛 ，洗骨髓腔收集骨髓悬液。
4. 1200 rpm 离心 5 分钟，弃上 🦊 清。
5. 重悬 🍁 于 🦋 RPMI1640 培养液中。
二、固定1. 取 🐞 1 × 10^6 个细胞，加 💐 入等体积 🐛 的 2% PFA 固定液。
2. 4℃ 固 🐋 定 🌷 15 分 🌺 钟。
3. 1200 rpm 离心 5 分 🌳 钟，弃上 🍀 清。
4. 重 🐡 悬于 🐵 PBS 中 🐞 。
三、透化1. 取固定 🍀 后 🐶 的细胞，加入等体积的 0.1% Triton X100 透化液。
2. 室温 🐕 透 🐟 化 10 分钟。
3. 1200 rpm 离 🐋 心 5 分钟，弃 🐟 上清。
4. 重 🌴 悬于 PBS 中。
四、染色1. 取 10 μL 细胞悬液 🍁 ，滴于盖玻片上。
2. 加 🌴 入 🐋 20 μL DAPI 染色液 🌳 ，混匀。
3. 室温染色 🦟 10 分 🐵 钟。
五、观察1. 用载 💮 玻片盖住盖玻片。
2. 在荧光显 🌸 微镜下 🌴 观察染色后的细胞。
实验结果在荧光显微镜下观察到染色后的骨髓造血干细胞细胞，核染色，呈蓝色染色体清晰可见。通，过。计数染色体数目 🦈 可以分析细胞的倍性
实验讨论染色体分析是细胞 🐴 遗传学中的一项基本技术，广泛应用于细胞发育基、因组学和疾病诊断等领域本。实，验。通，过，小。鼠骨髓造血干细胞的染色体制备和观察掌握了染 🌷 色体分析的基本步骤通过计数染色体数目可以了解细胞的倍性推测细胞处于 🐱 不同的细胞周期阶段
注意事项1. 实验过程中应在超净工作台中进行 🐦 ，防止 🦍 细胞污染。
2. 透化时间不宜过长，否则 🦅 会 🌵 破坏细 🐝 胞结构。
3. 染色时间不宜过长，否 🐬 ，则会导致染色质过浓影响观察。
4. 观察时应选择染 🐋 色清晰的细胞，以便准确计数染色体数目 🐈 。
3、小 🐯 鼠骨髓造血干细胞形成各种血细胞
陈述：小鼠骨髓造血干细 🦢 胞 🐱 形成各种血细胞。
证据：骨髓是小鼠造血干细胞的主要来源骨髓是骨：骼腔内的一种柔软组织，含有未分化 🌼 的造血 🐵 干细胞。这。些干细胞具有自我更新和分化为不同 🌷 类型血细胞的能力
造 🐟 血干细胞分化为前体细胞造血干细胞：在骨髓微 🦈 环境中分化为髓系前体细胞和淋巴系 🕸 前体细胞。
髓系前体细胞生成粒细胞和红细胞髓系前体细胞：进一 🐶 步分化为中性粒 🌵 细胞、嗜、酸性粒细胞嗜碱性粒细胞和红细胞。
淋巴系前 🦅 体细胞生成淋巴细胞淋巴系前体细胞：分化为淋巴细胞，包括细胞细胞T和、B自然杀伤细胞。
其他支 🐛 持 🐕 证据：
研究表明，小，鼠骨髓移植可以重建接受者的造血 🕊 系统产生各种血细胞。
造血干细胞标记实验追踪了单一造血干细胞分化为不同血细 🦈 胞谱系的轨迹。
结论：基于这些证据，可，以得出结论小鼠骨髓造血干细胞具有形成各种血细 🐞 胞的潜能。
4、小鼠和人的造血干细胞都具有的表 🌷
小鼠和人的造血干 🌺 细胞共同表达 🦍 的表 ☘ 面标志
CD34：造血干细胞和祖细胞的标志，参与细胞 🐅 粘附和迁移。
Thy1：小鼠造血干 🌹 细胞的特异性标志，参与细胞识别和相互 🦆 作用。
Sca1：小鼠造血干细胞和祖细胞的标志，与自我更新和 🐡 归巢特性有关。
Kit (cKit)：受体酪氨酸激酶，在，造血干细胞和祖细胞上表达 🐴 参与细胞增殖、分化和存活。
Flk1/KDR：血管内皮生 🐕 长因子受体，在，造血干细胞和祖细胞上表达 🐦 参与血管生成和细胞迁移。
CD133：跨膜 🐈 糖蛋白，在，造血干细胞和胚胎干细胞上表 🍁 达与 🦆 自我更新和多能性有关。
CD90：糖蛋白 🕷 ，在，造血干细胞和间充质干 🕸 细胞上表达参与 🌾 细胞粘附和迁移。
CD45：白细胞共同 🐎 抗原，在，所有造血细胞上表达但 🦉 造血 🦢 干细胞表达较低。
CD44：糖 🌵 蛋白，参，与细胞粘 🦉 附和 🦊 信号传导在造血干细胞和祖细胞上表达。
CD105：内皮细胞生长 🌿 因子受体，在，造血干细胞 🐼 和祖细胞上表达 🪴 参与血管生成和细胞迁移。
CD144：血管内皮钙黏附分子，在，造血 🐼 干细胞和祖细胞上表达参与细胞粘附和迁移 🦁 。
