primogenix小鼠胚胎干细胞（基于胚胎干细胞的基因敲除小鼠制备原理与过程）
- 作者: 李恩橙
- 来源: 投稿
- 2025-01-05
1、primogenix小鼠胚胎干细胞
定义Primogenix 小鼠胚胎干细胞 (mESC) 是一类从囊胚内细胞团（ICM）中分离出来的多能干细胞。与其他类型的 mESC 相比，它们具有独特的特性。
特性早期的发育阶段：Primogenix mESC 来源于囊胚早期，相当于人类胚胎的胚泡阶段。
高多能性：它们可以分化成所有类型的体细胞，包括外胚层、中胚层和内胚层。
扩增能力强：可以在体外培养皿中无限增殖，同时保持其多能性。
质控严格：Primogenix mESC 经过严格的质量控制，以确保其身份、稳定性和安全性。
培养基特：提供经过优化和验证的培养基特，以促进 Primogenix mESC 的培养和分化。
应用Primogenix mESC 被广泛用于：
发育生物学研究：研究早期胚胎发育和分化机制。
干细胞移植：用于治疗疾病，例如帕金森病和脊髓损伤。
药物筛选：测试新药的毒性和有效性。
再生医学：生成用于移植的特定细胞类型，例如心脏细胞或神经元。
优势早期的发育阶段使其更接近人类胚胎干细胞。
高扩增能力和多能性使其在体外培养和研究方面具有实用性。
严格的质控确保了安全性、稳定性和可重复性。
优化培养基特简化了培养和分化过程。
Primogenix mESC 是多能干细胞研究和应用领域的重要工具。它们独特的发育阶段和优越的特性使其成为发育生物学、再生医学和药物发现的有价值资源。
2、基于胚胎干细胞的基因敲除小鼠制备原理与过程
基于胚胎干细胞的基因敲除小鼠制备
原理胚胎干细胞（ES 细胞）是一种多能干细胞，可以在胚胎发育过程中分化成任何类型的细胞。通过基因敲除技术，可以在 ES 细胞中特异性地破坏目标基因，然后将敲除的 ES 细胞注射到小鼠胚胎中，发育形成基因敲除小鼠。
过程1. 构建靶向敲除载体
设计并构建一个靶向敲除载体。该载体包含两个同源臂，分别与目标基因的外显子序列同源，以及一个选择标记（如抗生素抗性基因）。
2. 电穿孔 ES 细胞
将靶向敲除载体通过电穿孔转染到 ES 细胞中。
3. 筛选敲除细胞
经过电穿孔，一部分 ES 细胞会整合并表达靶向敲除载体。通过使用选择标记，可以筛选出这些敲除细胞。
4. 验证敲除
使用 PCR、Southern 杂交或 DNA 测序等方法验证敲除细胞中目标基因是否被特异性敲除。
5. 注射敲除 ES 细胞
将验证后的敲除 ES 细胞注射到小鼠胚泡腔内。
6. 植入和怀孕
将注射了 ES 细胞的胚泡植入伪妊娠雌小鼠的子宫中。
7. 产仔
雌小鼠怀孕并产下小鼠，其中一部分小鼠携带了基因敲除。
8. 鉴定基因敲除小鼠
通过基因分型（如 PCR 或 Southern 杂交）鉴定携带基因敲除的子代小鼠。
9. 繁育和分析
将携带基因敲除的子代小鼠与野生型小鼠进行繁育，以建立纯合子敲除小鼠系。对基因敲除小鼠进行表型分析，研究目标基因的功能和机制。
3、小鼠胚胎干细胞可以来自囊胚中的
内细胞团4、小鼠胚胎干细胞最早于多少年获得
1981年
