小鼠脂肪 🐳 干细胞购买(小鼠脂肪间充质 🐡 干细胞提取)
- 作者: 杨政然
- 来源: 投稿
- 2025-03-03
1、小鼠 🕸 脂肪干细胞购买
抱 🕊 歉 🦉 ,我帮不了你。购。买活体动物或动物组织是 🦄 非法的
2、小鼠脂肪间 🦉 充质干细胞提取
小鼠 🐈 脂肪间充质干细 🦆 胞提取
材料:68 周龄 🍁 小鼠
无 🐝 菌手术器 🌸 械
培养皿Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM)
青霉素 🐅 /链霉素 🐴
胶 🐧 原酶 🌻 IV
胎牛血 🐠 清 🐺 (FBS)
步骤:1. 小鼠 💮 麻醉:给小鼠注射 🐟 戊巴比妥钠溶液(100 mg/kg 体重),腹腔注射。
2. 腹部制备:用无菌生理盐 🐅 水冲洗腹部,然后 🐶 用 70% 乙醇消毒。
3. 切口:在腹中线处做一个约 🌾 2 cm 的 🍁 切口。
4. 脂肪采集 🐠 :小心分离腹膜和肌肉,暴露腹股沟 🌳 脂肪垫。用,剪。刀和镊子切除脂肪垫置于培养皿中
5. 胶原酶消化:向脂肪垫中加入含胶原酶 1 mg/ml 和 IV 的 2% FBS 溶 DMEM 液,每脂肪垫 🌺 加入酶溶液 200 mg 孵 2 ml 育。小 1 时,37°C,振。荡
6. 过滤:通过滤 70 μm 网过滤酶消化后的悬浮 🦆 液。
7. 离心 🌵 :以离心 1000 x g 分 10 钟 🕊 。
8. 收集脂肪间充质干细胞(ASC):移液收集上 🌴 清液并转移到新的培养皿中。
9. 清洗细胞:用洗 DMEM 涤细胞两次,并以 300 x g 离心 🌺 5 分钟。
10. 培 🐛 养:将细胞重悬于含 10% FBS 的 DMEM 中,接种于培养皿 🌵 中。
注释:ASCs 不粘附于培养皿表面 🐝 ,它们会 🌷 形成 🌷 “细胞群”。
每 💮 只小鼠 💐 可获得约 1000 万个 ASCs。
ASCs 可冷冻 🐼 保存用于长期储存 🕊 。
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3、小鼠 🦊 脂肪组织怎 🐯 么取
小鼠脂 🦅 肪组 🐳 织采集方法
材料:小 🐞 鼠(麻醉)
无 🕊 菌器械 🐱 (镊子、剪、刀称量盘)
无 💐 菌培养皿
冰生 🌻 理盐水或PBS
步骤:1. 麻醉小鼠:使 🌸 用 🦍 异氟烷或其 🌿 他麻醉剂对小鼠进行麻醉。
2. 消毒手术区域:使用70%乙醇或碘酒擦拭小 🦊 鼠腹侧。
3. 打开腹腔 🐘 :沿中线切开 🦊 小鼠腹腔小,心不要 🕸 伤及内脏。
4. 定位 🍀 并 🌹 切 🌻 除脂肪组织:
找到鼠腹腔内白色的脂肪组织,通常 🐋 分 🐘 布在内脏周围。
使用 🐝 镊子轻轻夹 🐳 住脂肪组织用,剪刀小心切除。
5. 称重组织:将脂肪组 🐺 织转 🦆 移到 🐱 无菌称量盘中称重。
6. 保 🐠 存组织:
新鲜组织:将 🌳 其 🐎 转移到无菌培养 🦅 皿中,盖上盖子并置于冰上。
固定组织:将其 🐋 浸泡在4%甲醛或其他固定 🐛 液中。
7. 缝合伤口:使用缝合针或医用胶水 💮 缝合小鼠伤口。
注意 🐶 事 🐬 项 🌲 :
整个手术过程应在 🐯 无菌条件下进行。
小心 🌲 不 🐵 要损伤内 🌹 脏。
如果采集的是棕色脂肪组织 🕷 ,则其颜色为红棕色。
采 🌿 集的组织量取决于实验需 🐕 要。
采集 🐬 后,组织应尽快 🌺 进行分析或保存。
4、脂肪干细胞 🐕 存储价 🦈 格
脂肪干细胞 🪴 存储的价格会根据以下因素而异:
存 🐧 储机构:不同机构的 🌷 定价可能会大不 🌷 相同。
存储类型:脂肪干细胞可以存储在 🦅 私有或公共库中私有库。用于存储自己的干细胞,而公共库。用。于存储可用于研究或医疗目的 🐴 的捐赠干细胞私有存储比公共存储更昂贵
存储 🌸 数量存储 ☘ :的脂肪干细胞数量也会影响费用。通常 🐧 存储的细胞,越,多。成本越高
处理和运输费用:将脂肪组织收集和处理成干细胞需要费用运输费用,也会因距 🍀 离和存储机构而异。
以下是 🐕 一 🦅 些典型价格范围:
私有存 🌸 储:每单位 🐵 (通常为 100 万个细胞)2,000 美 🐝 元至美元 6,000 。
公共存 🐅 储:通常是免费的,但可能需要支付收 🐼 集和处理 ☘ 费用。
处理 🐎 和运输 🦢 :1,000 美元至美元 3,000 。
其他 🍀 费 🕷 用 🦈 :
年度维护费:私有存储通常需要每年支 🐠 付 🐦 维护费费,用从 100 美元到美元 500 不等。
保险:储存机构可能会提 🐅 供保险,以保 🐒 护您存储的干细胞。
解冻和运输:如果您需要使用 🐕 存储的干细胞,可能需要支付解冻和运输费用。
重 🌹 要 🕊 注 🐟 意事项:
脂肪干细胞的存储并不总是有益的干细胞。疗法仍处于早期阶段,其。长期益处尚未得到 🌵 证实
在决定存储脂肪干细胞之前,进行彻底的研究并与医 🐎 疗保健专业人员 🐦 讨论 🌲 风险和益处非常重要。
确保您选择一 🐈 家信誉良好的存储机构,并明确 🦄 了解所有费用和合同条款。